Реєстраційний номер
0219U102022,
0119U101914
, Науково-дослідна робота
Назва роботи
Вплив циркулюючих вірусних трансактиваторних білків (ВІЛ-1 Tat та ЕБВ Zta) на експресію генів у В-клітинному лімфомагенезі
Назва етапу роботи
Керівник роботи
Скрипкіна Інесса Яківна, Кандидат біологічних наук
Дата реєстрації
13-12-2019
Організація виконавець
Інститут молекулярної біології і генетики Національної академії наук України
Опис етапу
Використовуючи cтворені рекомбінантні конструкції. що містили повні кодуючі послідовності гена ERVW-1, у новоствореному векторі pCDH-Puro для лентивірусної трансдукції, та конструкції з чотирма вбудованими гайд-олігами у векторі pSpCas9(BB)-A2-Puro для CRISPR/Cas9-нокауту гена ERVW-1, проведено роботу по створенню нокаут них за ERVW-1 ліній В-клітин та астроцитів і та клітин астроцитом з ектопічною експресією цього гена. Відібрано для перевірки мутацій геному 26 ліній клітин з нокаутом гена ERVW-1 та визначено лінії з ектопічною експресією
Опис продукції
В-клітини та клітини лінії астроцитів U251 MG були трансфікованіковані конструкціями з вбудованими гайд-олігами у векторі pSpCas9(BB)-A2-Puro для CRISPR/Cas9-нокауту гена ERVW-1 та pCDH-PuroERVW-1 для лентивірусної трансдукції. Субклони клітин відбиралися шляхом селекції на пуроміцині. Стійкі до пуроміцину клітини розмножили для виділення ДНК і РНК, щоб перевірити (підтвердити) втрату (нокаут гена) чи експресію (лентивірусна трансдукція) гена ERVW-1.
Автори роботи
Анопрієнко Ольга Валентинівна
Арешков Павло Олександрович
Шаблій Володимир Анатолійович
Додано/оновлено в НРАТ
2020-04-02
