Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0220U000612, 0116U000039 , Науково-дослідна робота Назва роботи Розробка клітинної тест-системи для оцінки ефективності та механізмів впливу протипухлинних лікарських засобів. Назва етапу роботи Керівник роботи Сидоренко Михайло Васильович, Дата реєстрації 06-07-2020 Організація виконавець ДУ "Відділення біотехнічних проблем діагностики Інституту проблем кріобіології і кріомедицини НАН України " Опис етапу РЕФЕРАТ. Звіт про НДР: стор.41, рис. - 11, табл. - 2, джерел посилань – 53. Об’єкт досліджень: пухлинні сфероїди лінії MCF-7, Доксорубіцин, Метатрексат, Цисплатин, Саліноміцин. В роботі були задіяні цитологічні, імунологічні, біохімічні та статистичні методи аналізу. Метою дослідження було порівняти реактивність моношарової та сфероїдної культур в умовах модифікації факторів мікрооточення. Визначення проліфераційних, морфологічних, кінетичних характеристик сфероїдів та моношарової культури за умов інкубування з протипухлинними препаратами та саліноміцином. Задачами дослідження було визначення чутливості пухлинних клітин у моношаровій культурі до класичних протипухлинних препаратів в порівнянні з саліноміцином. Визначення впливу протипухлинних препаратів та саліноміцину на рецепторний профіль клітин раку молочної залози та на пул стовбурових пухлинних клітин, а також на здатність пухлинних клітин до утворення колоній. В результаті досліджень було виявлено, що пухлинні клітини у 2D культурі найменш чутливі до впливу метатрексату (ІС50 - 67,22). Цитотоксичний вплив доксорубіцину та саліноміцину був однаковий. ІС50 доксорубіцину - 14,93, ІС50 саліноміцину – 14,5. Найбільший цитотоксичний вплив на клітини MCF-7 в моношаровій культурі мав цисплатин, ІС50 – 2,52. При цьому, під впливом саліноміцину в концентрації 30,0 мкг/мл експресія маркерів СПК CD133 (у 1,4 рази) та CD44 (у 1,3 рази) дещо знижувалась, а експресія bmi-1 залишалась на рівні з контролем. Водночас, експресія цитокератинів статистично достовірно підвищувалась у 2,3 рази, а Р-ЕФР знижувалась у 3,7 рази. Інкубування пухлинних клітин в присутності цисплатину (1,0 мкг/мл) статистично достовірно стимулювало зниження експресії маркерів СПК: CD44 (у 2,3 рази), CD133 (у 6,5 рази), bmi-1 (у 1,2 рази) та підвищення експресії цитокератинів 8 та 14 у 1,2 рази, а Р-ЕФР у 1,3 рази, в порівнянні з контролем. Культивування клітин MCF-7 в присутності метатрексату в концентрації 10,0 мкг/мл призводило до достовірного збільшення кількості клітин, які експресують маркери стовбурових пухлинних клітин, в порівнянні з контрольними зразками: CD133 – у 1,3 рази, CD44 – у 2 рази, bmi - у 1,2 рази. Одночасно, відсоток клітин MCF-7, що експресують цитокератини 8 та 14 та Р-ЕФР зменшувався (у 4,3 та 2,9 рази відповідно). В присутності доксорубіцину 10,0 мкг/мл, так само як й при інкубуванні з метатрексатом, статистично достовірно знужувалась експресія цитокератинів 8 та 14 (у 1,7 рази) та Р-ЕФР (у 1,5 рази). Одночасно збільшувалась експресія CD44 (у 2,2 рази), CD133 (1,5 рази), bmi-1(у 1,4 рази) порівняно з контролем. Саліноміцин (30,0 мкг/мл) та цисплатин (1,0 мкг/мл) мали найбільший вплив на колонієутворюючу здатність клітин MCF-7. Інкубування з цими препаратами призводило до зниження кількості колоній на 65% та 60% відповідно, в порівнянні з контролем. Клоногенна здатність MCF-7 після нетривалого інкубування з доксорубіцином була знижена на 50%, порівняно з контролем. Метотрексат мав найменший вплив на здатність пухлинних клітин до утворення колоній в адгезивній фракції серед досліджуваних препаратів - зниження колонієутворюючої здатності пухлинних клітин складало 40%, порівняно з контролем. Таким чином, було зроблено припущення, що цисплатин та саліноміцин мають цитотоксичний вплив на популяцію стовбурових пухлинних клітин лінії MCF-7 в моношаровій культурі та викликають зниження здатності клітин до колонієутворення. Метатрексат та доксорубіцин також мають цитотоксичний вплив на пухлинні клітини, але це не призводить до зменшення пулу стовбурових пухлинних клітин та зниження колоніє утворюючої здатності клітин. Наукова та практична значимість. Отримані дані є ілюстрацією гетерогенності популяції пухлинних клітин та здатності змінювати фенотип в залежності від умов мікрооточення. Було проведено тестування новітнього антибіотика - саліноміцина, порівняно його вплив на пухлинні клітини з впливом класичних протипухлинних препаратів. В результаті досліджень виявлено, які пули пухлинних клітин чутливі до кожного з досліджуваних препаратів, що дасть можливість розробляти нові схеми лікування онкологічних хворих. В подальшому дослідження будуть продовжені на моделі багатоклітинних пухлинних сфероїдів для з'ясування впливу препаратів на пул стовбурових пухлинних клітин. Ключові слова: Сфероїди лінії MCF-7, Доксорубіцин, Метотрексат, Цисплатин, Саліноміцин. Опис продукції Автори роботи Гергелюк Т.С. Железна М.В. Лебедєва Т.М. Перепелиціна Олена Михайлівна Просяник Л.Б. Сидоренко Михайло Васильвич Фіда В.В. Додано в НРАТ 2020-10-01 Закрити