Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0220U100759, 0117U002416 , Науково-дослідна робота Назва роботи Розробити агрегаційну методику створення ранніх in vitro-ембріонів ссавців покращеної життєздатності Назва етапу роботи Керівник роботи Лобачова Ірина Вікторівна, Кандидат сільськогосподарських наук Дата реєстрації 27-01-2020 Організація виконавець Інститут тваринництва степових районів ім. М.Ф. Іванова "Асканія-Нова" УААН Опис етапу  Об’єкт дослідження – ооцити, зиготи, ранні ембріони ссавців, отримані in vivo та in vitro, проліферативна та агрегаційна здатність бластомерів. Мета досліджень – розробити методику агрегації підданих дисоціації і проміжному культивуванню бласто-мерів, ізольованих із зигот та ранніх ембріонів ссавців, як способу підвищення життєздатності in vitro-зародків. Методи досліджень – емпіричні: експеримент (культивування клітин, клітинна інженерія), мікроскопія, опис; універсальні: аналіз (статистичний, кореляційний та порівняльний), узагальнення. Викладені результати вивчення здатності бластомерів in vivo- та in vitro зигот та ранніх ембріонів овець и ла-бораторних мишей, ізольованих із прозорої оболонки та підданих дисоціації, до цитокінезу, асоціювання у стійкі конгломерати, наступної компактизації та утворенню бластопорожнин за доповнення культуральних середовищ неорганічними та органічними компонентами, а також результати дослідів з вдосконалення етапів методики отримання зигот та ранніх ембріонів ссавців in vitro. Сфера застосування – біологія відтворення, репродуктивна біотехнологія. Опис продукції Методичні рекомендації, що містять опис методичних прийомів отримання in vivo- та in vitro-зигот та ранніх ембріонів ссавців, опис способу ізолювання бластомерів із прозорої оболонки, опис процедури підготовки лабораторного посуду для культивування зигот, ем-бріонів та ізольованих бластомерів, опис процедури розміщення ізольованих бластомерів та ініціювання утворення ними стійких конгломератів, склад середовищ 4-етапної процедури in vitro-дорощування утворених конгломератів, інтактних зигот та ранніх ембріонів. Складається з 4-етапного дорощування in vivo зигот ссавців у середовищах, склад яких ва-ріює за вмістом ЕДТА, іонів кальцію та магнію, незамінних та замінних амінокислот, глюко-зи, джерела кальцію. Тривалість перших 3-х етапів становить 20–24 години. Спосіб призначений для створення заглиблень (лунок) у дні пластикових чашки з залученням методу «нагортання», за якого лунки формують підсуванням розплавленого пластику з боків. Діаметр дна лунок обирають таким, що допускає розміщення в одній площині не більш 4 ізольованих бластомерів. Спосіб передбачає розміщення ізольованих із прозорої оболонки та підданих дисоціації бластомерів ранніх зародків ссавців у штучно створених лунках, які забезпечують тривале контактуванню клітин цитоплазматичними мембранами, та одночасне збільшення вмісту іонів кальцію у культуральній краплі з 0–1,71 до 3,4 мМ. Спосіб передбачає ферментативне розчинення прозорої оболонки in vivo-зигот ссавців у 0,1 %-ному розчині протеїнази К перед розміщенням зигот на дорощування у середовищі відповідного складу. Автори роботи Іванина Олександр Володимирович Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити