Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0220U102302, 0118U006260 , Науково-дослідна робота Назва роботи Розробка та оптимізація ферментних електрохімічних біосенсорів на основі нових функціональних наноматеріалів для визначення аргініну та їх застосування для контролю якості плодово-ягідних соків та засобів гігієни. Розділ 3. Розробка референтних методів аналізу аргініну за використання аргініно-гідролізуючих рекомбінантних ферментів Назва етапу роботи Керівник роботи Сибірний Андрій Андрійович, Дата реєстрації 11-03-2020 Організація виконавець Iнститут бiологiї клiтини НАН України Опис етапу Звіт про НДР: 38 с., 15 рис., 4 табл., 87 джерел. Об’єкти дослідження: ферменти аргіназа, аргініндеїміназа та їх мікробні рекомбінантні продуценти, аргініноксидаза, шапінкові і мікроскопічні гриби, бактерії як продуценти аргініноксидази. Мета комплексної НДР: Розробка та оптимізація ферментних електрохімічних біосенсорів на основі нових функціональних наноматеріалів для визначення аргініну та їх застосування для контролю якості плодово-ягідних соків та засобів гігієни. Мета розділу 3 НДР: Розробка референтних методів аналізу аргініну за використання аргініно-гідролізуючих рекомбінантних ферментів Мета етапу 2 (2019 р.) розділу 3: Пошук та оптимізація технологій одержання препаратів аргінін-гідролізуючих ферментів з клітин мікробних продуцентів. Методи дослідження: мікробіологічні, біохімічні, фізико-хімічні, аналітичні. У результаті досліджень: - Оптимізовано технології одержання та зберігання високоочищених препаратів рекомбінантних аргінін-гідролізуючих ферментів, зокрема, аргінази та аргініндеімінази (АДІ), з клітин відповідних рекомбінантних продуцентів, створених в ІБК НАН України в результаті попередніх досліджень. - Виділено, охарактеризовано та передано для досліджень в ІМБіГ НАНУ високоочищені препарати аргінази та АДІ. - Здійснено скринінг штамів мікроорганізмів та шапинкових грибів з метою пошуку ефективних продуцентів нового фермента - аргініноксидази (АргО). - Оптимізовано умови культивування клітин обраних штамів-продуцентів та розроблено технологію виділення цільового фермента; препарат АргО одержано в аналітичних кількостях та частково охарактеризовано. Пропонована розробка відповідає рівню кращих зарубіжних прототипів. За результатами НДР опубліковано 2 статті, 2 розділу в монографіях і 4 тез доповідей міжнародних конференцій. КЛЮЧОВІ СЛОВА: АРГІНАЗА, АРГІНІНДЕІМІНАЗА, АРГІНІНОКСИДАЗА, СКРИНІНГ ШТАМІВ-ПРОДУЦЕНТІВ, МЕТОДИ ВИДІЛЕННЯ ФЕРМЕНТІВ   Опис продукції 1. Оптимізовано технології одержання препаратів аргінази та аргініндеїмінази з клітин рекомбінантних мікробних продуцентів із підвищеним вмістом цих ферментів, препарати ферментів виділено, очищено, охарактеризовано та передано у лабораторію біомолекулярної електроніки ІМБіГ НАН України для спільних досліджень за темою НДР. 2. Здійснено пошук ефективних продуцентів аргініноксидази, для цього проведено скринінг більш ніж 60 штамів культур різноманітних мікроорганізмів (неконвенційних дріжджів, бактерій роду Pseudomonas, мікроскопічних грибів), а також шапинкових грибів. 3. Розроблено скринінгові експрес-тести виявлення аргініноксидази, досліджено умови культивування бактерійних штамів-продуцентів, а саме, склад середовища, індукційний вплив аргініну, час та температура, для накопичення активного ферменту. 4. Запропоновано методи виділення та очистки аргініноксидази з культур кращого бактерійного штаму-продуценту бактерій Pseudomonas putida УКМ В-117 та шапинкового гриба Amanita phalloides. 5. Препарати аргініноксидази виділено в аналітичних кількостях та вивчено деякі властивості ферменту, а саме, субстратну специфічність, умови зберігання, рН- і температурний оптимуми. Автори роботи Іваш Марія Федорівна Гайда Галина Зуфарівна Куцяба Василь Іванович Фаюра Любов Романівна Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити