Реєстраційний номер
0220U102586,
0119U000577
, Науково-дослідна робота
Назва роботи
Дослідити фенотипові, функціональні та молекулярно-генетичні характеристики пухлинних клітин із властивостями стовбурових та обґрунтувати доцільність їх застосування в якості імунотерапевтичної мішені
Назва етапу роботи
Керівник роботи
Храновська Наталя Миколаївна,
Дата реєстрації
07-04-2020
Організація виконавець
Національний інститут раку
Опис етапу
Розроблено методичні підходи до трьохвимірного сфероїдного росту клітин пухлинних ліній людини та миші in vitro з метою збагачення культур клітинами із стовбуровими властивостями.
Встановлено, що на 6-ту добу культивування адгезивної культури карциноми легені Льюїс (КЛЛ) з додаванням 0,2 % карбоксиметилцелюлози, утворювалась найбільша кількість пухлинних сфероїдів (ПС) із максимальними розмірами.
Згідно молекулярно-генетичного профілю, додаткове застосування 0,2 % карбоксиметилцелюлози не сприяло генерації значної кількості клітин у ПС КЛЛ, що несуть маркери стовбурових клітин.
Встановлено, що ПС недрібноклітинного раку легені MOR на 6-ту добу культивування із додаванням 0,2% карбоксиметилцелюлози утворюють side population (SP), що характеризуються збільшенням індексу виключення барвника R-123 у порівнянні із адгезивними ПК (р≤0,05).
Встановлено, що отримані на 6-ту добу культивування ПС клітин лінії MOR за своїми фенотиповими характеристиками (CD90 та CD117) не відрізняються від клітин моношару MOR.
Встановлено, що рівні експресії мРНК поверхневих маркерів CD44 та CD133 у ПС лінії MOR достовірно вище у порівнянні із значеннями в моношарі адгезивних ПК (р≤0,05).
Встановлено, що рівні експресії мРНК всіх досліджуваних маркерів стовбурових клітин (ALDH1, SOX2, Nanog, CD44 та CD133) були достовірно нижчими в клітинах супернатанту у порівнянні із значеннями у моношарі адгезивних клітин та ПС.
Отримані ПС MOR в умовах 0,2% карбоксиметилцелюлози за відсутності ембріональної телячої сироватки (ЕТС) мають деякі властивості стовбурових клітин, проте кількість ПСК все ще недостатня для використання їх в якості джерела пухлинних антигенів при конструюванні ДК вакцин, тому в наступних дослідженнях планується використання низькоадгезивних умов культивування та ростового фактору EGF.
Опис продукції
Отримані пухлинні сфероїди пухлинних клітинних ліній в умовах 0,2% карбоксиметилцелюлози за відсутності ембріональної телячої сироватки мають деякі властивості стовбурових клітин, проте кількість пухлинних стовбурових клітин все ще недостатня для використання їх в якості джерела пухлинних антигенів.
Автори роботи
Горбач Олександр Ігорович
Скачкова Оксана Володимирівна
Храновська Наталя Миколаївна
Додано/оновлено в НРАТ
2020-07-03
