Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0220U104692, 0120U100197 , Науково-дослідна робота Назва роботи Керована доставка цільових генів у клітини ссавців з використанням нових вітчизняних біосумісних полімерних наноматеріалів Назва етапу роботи Керівник роботи Фінюк Наталія Степанівна, Кандидат біологічних наук Дата реєстрації 24-12-2020 Організація виконавець Інститут біології клітини НАН України Опис етапу  Досліджено 14 нових полімерних наноматеріалів на основі полі(2-диметиламіно) етилметакрилату (поліДMAEMA) як носіїв для доставки генів у клітини ссавців. Продемонстровано ефективну іммобілізацію ДНК плазміди pEGFPc-1 полімерними носіями на основі (полі-ДMAEMA: mPEG475DM1, F8DM4, F8DM2, F8DM1, F16DM2, F16DM1, F12DM2, F12DM1, полі-ДMAEMA-MP, BP83-1, BA-DM2, BA-DM1, LA-DM2, LA-DM1. Використано різні буферні системи і розчини (фізіологічний розчин, розчин Рінгера, розчин Хенкса, фосфатно-сольовий буфер (PBS), Тріс-сольовий буфер (TBS), безсироваткове культуральне середовище DMEM чи RPMI1640 (залежно від відповідної лінії клітин)) для утворення комплексу полімер/ДНК плазміди і наступної трансфекції клітин. При використанні комплексу полімер/ДНК плазміди, утвореному у безсироватковому культуральному середовищі, спостерігали вищу ефективність трансфекції клітин ссавців порівняно з використанням комплексів, утворених в інших середовищах. Встановлено здатність носіїв полі-ДМАЕМА доставляти ДНК плазміди pEGFPc-1 у клітини ліній HEK293 і HEK293T нирки ембріона людини, MCF-7 аденокарциноми молочної залози людини, HeLa карциноми шийки матки людини, HCT116 колоректальної карциноми людини, U251MG гліобластоми людини, HepG2 гепатокарциноми людини, A549 карциноми легені людини in vitro з ефективністю трансфекції на рівні 1,0-67,9%. Носії полі-ДМАЕМА в робочій концентрації 0,0002% демонстрували низьку токсичність щодо клітин ссавців (94,8-79,9% живих клітин), тоді як за дії поліетиленіміну – 60,9-53,0%, живих клітин. Досліджувані носії полі-DMAEMA спричиняли менше однониткових розривів у молекулі ДНК клітин HEK293: показник пошкодження ДНК Olive tail moment становив 2,7-3,6%, порівняно з поліетиленіміном (Olive tail moment становив 5,8%). Полімери не володіють генотоксичною і мутагенною активністю, оскільки вони не здатні індукувати генні мутації у тесті Еймса, а також не збільшували частоту хромосомних аберацій і мікроядерець у біотесті з використанням Allium cepa. Опис продукції Автори роботи Козак Юлія Сергіївна Фінюк Наталія Степанівна Додано в НРАТ 2020-12-24 Закрити