Реєстраційний номер
0220U104728,
0115U003745
, Науково-дослідна робота
Назва роботи
Особливості структурно-функціональної організації mTOR/S6K-залежного сигнального каскаду в нормальних та злоякісних клітинах: множинність сплайсових ізоформ mTOR та S6K кіназ
Назва етапу роботи
Керівник роботи
Філоненко Валерій Вікторович, Доктор біологічних наук
Дата реєстрації
26-12-2020
Організація виконавець
Інститут молекулярної біології і генетики Національної академії наук України
Опис етапу
Запропоновано щонайменше два механізми, не пов’язані з класичним сплайсингом, утворення мРНК ізоформ мTOR, що позбавлені, чи навпаки містять нативний каталітичний домен кінази і отже можуть виконувати важливі регуляторні функції. Перший механізм полягає в транскрипційному зісковзуванні, а інший в ендонуклеазному вирізанні ділянки делеції вже на рівні сплайсованої мРНК в цитоплазмі.
Ідентифіковано та охарактеризовано дві нові ізоформи кінази рибосомного білка S6 (S6K1) – р55 та р60, що мають каталітичний домен та позбавлені відповідно С- та N-кінцевого регуляторного домену. Запропоновано молекулярні механізми їхнього утворення.
З використання системи геномного редагування створено клітинні лінії з редагованою експресією відомих та щойно ідентифікованих ізоформ S6K1. З застосуванням зазначених ліній досліджено їхню функціональну активність в клітині. Встановлено, що на відміну від класичних р70 та р85 ізоформ нові є конститутивно активними і їхня активність не залежить від активності mTOR. Встановлено, що експресія виключно р60 ізоформи призводить до епітелійно-мезенхимного переходу, а отже вона є важливою ланкою в інвазії та метастазуванні злоякісних клітин. Встановлено тканино специфічний характер експресії.
Проаналізовано особливості субклітинної локалізації ізоформ mTOR та S6K1 та характеру утворюваних білкових комплексів.
Ідентифіковано новий тип післятрансляційної модифікації білків за участі коензима А – Коалювання. Доведено, що Ко-Алювання є новим механізмом захисту білків від окиснення та деградації за умови окисного, чи метаболічного стресу , та новим механізмом регуляції активності ензимів.
Опис продукції
Автори роботи
Гаріфулін Олег Мінірович
Крупька Ірина Володимирівна
Маланчук Оксана Миколаївна
Погрібна Алла Петрівна
Савінська Лілія Олексійовна
Скороход Олександр Миколайович
Тихонкова Ірина Олександрівна
Хоруженко Антоніна Іванівна
Яковенко Людмила Федорівна
Додано/оновлено в НРАТ
2020-12-26
