Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0221U104465, 0119U103905 , Науково-дослідна робота Назва роботи Роль мітохондріального білка MRPS18-2 та RB у контролі стовбуровості клітин та у канцерогенезі, 2.2.5.428 Назва етапу роботи Керівник роботи Кашуба Олена Віталіївна, Доктор біологічних наук Дата реєстрації 25-03-2021 Організація виконавець Інститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р.Є. Кавецького НАН України Опис етапу  На першому етапі було отримано протеїни, кодовані генами, що належать до родини MRPS18 (1-3) з використанням біохімічних методів трансляції протеїнів in vitro, використовуючи конструкти у векторі pGEM, та створено конструкти, що містять кДНК генів родини MRPS18 (1-3), у векторі, кодуючому злиті протеїни із тагом FLAG. Проведено кон’югацію убіквітина і вивчено кінетику деградації протеїнів MRPS18 (1-3) in vitro, використовуючи лізати ретикулоцитів. Показано, що всі протеїни родини MRPS18 мають різний період напіврозпаду, самим нестабільним є протеїн MRPS18-3, що деградується за декілька хвилин, а протеїн MRPS18-2 практично не руйнується. Час напіврозпаду білка MRPS18-1 складає 90 хв. Для дослідження можливості убіквітинування білків родини MRPS18 in vivo, провели трансфекції пухлинних клітин (MCF7, Cos7) отриманими конструктами для експресії злитих FLAG-протеїнів сімейства MRPS18, разом із плазмідою HA-Ub для синтезу НА-злитого убіквитину. За допомогою подвійного імунофарбування і флуоресцентної мікроскопії показано, що у трансфікованих клітинах спостерігається ко-локалізація протеїнів MRPS18-1 і -2 із убіквитном, на відміну від MRPS18-3. Опис продукції Автори роботи Вовколуп Катерина Володимирівна Кальман Сергій Сергійович Кашуба Олена Віталіївна Ковалевська Лариса Миколаївна Додано в НРАТ 2021-03-25 Закрити