Реєстраційний номер
0221U106974,
0121U109072
, Науково-дослідна робота
Назва роботи
Розробка та апробація діагностичного набору для визначення клінічно-значущих мутацій BRAF та інших пухлино-асоційованих генів у зразках злоякісних пухлин людини
Назва етапу роботи
Керівник роботи
Кашуба Володимир Іванович,
Дата реєстрації
23-12-2021
Організація виконавець
Інститут молекулярної біології і генетики Національної академії наук України
Опис етапу
У результаті виконання проєкту проведено дизайн, підбір та оптимізацію визначення низки мутацій гена BRAF у положенні 600 (V600E, V600E complex, V600D, V600K) (rs113488022, rs121913377, rs121913227).
Синтезовано позитивні контролі у вигляді плазмід, що мають як нормальну послідовність, так і мутовані. Проведено визначення ефективності та специфічності роботи праймерів для досліджуваних мутацій. Найбільш чутливі праймери до мутації А (V600E), яка є найбільш поширеною та клінічно-значущою. Специфічність їх роботи показала, що вони здатні детектувати дві мутації A та C, які диференціювати можна з використанням обох пар праймерів (праймери А і С).
Проведено скринінг тканин пухлин кишечника та яєчника як свіжозаморожених, так і парафінових блоків. У результаті виявлено позитивні на А мутацію зразки. Результати підтверджено за допомогою секвенування за Сенгером та секвенуванням нового покоління.
Розроблено протокол проведення аналізу, виготовлено лабораторні зразки та апробовано діагностичний набір для визначення клінічно-значущих мутацій гена BRAF у положенні 600.
Опис продукції
Автори роботи
Геращенко Ганна Володимирівна
Гордіюк Василь Васильович
Грищенко Наталія Володимирівна
Кашуба Володимир Іванович
Додано/оновлено в НРАТ
2021-12-23
