Звіт по науково-дослідній роботі. Сибірний Андрій Андрійович. Ідентифікація та з’ясування ролі нових структурних та регуляторних генів у надсинтезі рибофлавіну у флавіногенних дріжджів

Реєстраційний номер

0222U000561, 0121U109268 , Науково-дослідна робота

Назва роботи

Ідентифікація та з’ясування ролі нових структурних та регуляторних генів у надсинтезі рибофлавіну у флавіногенних дріжджів

Назва етапу роботи

Керівник роботи

Сибірний Андрій Андрійович,

Дата реєстрації

13-01-2022

Організація виконавець

Інститут біології клітини Національної академії наук України

Опис етапу

Досліджено видо-специфічну регуляцію транскрипції гена SEF1 C. famata. Встановлено, що промотори гена SEF1 дріжджів Candida albicans i Candida tropicalis відновлюють надсинтез рибофлавіну у штама C. famata з делецією гена SEF1. Клоновано ген SEF1 нефлавіногенних дріжджів Scheffersomyces stipitis та отримано штами C. famata із експресією цього гена, які будуть використані для з‘ясування ролі SEF1 у надсинтезі рибофлавіну у дріжджів. Сконструйовано штами дріжджів C. famata з додатковою копією центрального регуляторного гена SEF1 під контролем промотора гена LAC4 (кодує β–галактозидазу) C. famata на основі наявних продуцентів рибофлавіну. Досліджено вплив експресії гена SEF1 під контролем цих промоторів на продукцію рибофлавіну за різних умов вирощування. Встановлено, що рекомбінантні штами C. famata, які містять експресійну касету “pLAC4_cf-SEF1_cf”, мають в 1,6–2,1 рази вищий вихід рибофлавіну у середовищі з лактозою як єдиним джерелом Карбону у порівнянні з батьківським штамом AF4. Продукція рибофлавіну сконструйованими штамами при вирощуванні в колбах досягала 1.7 г/л. Підвищення синтезу рибофлавіну внаслідок надекспресії гена SEF1 під контролем промотора TEF1 було незначним. Сконструйовані штами дріжджів С. famata, що містять додаткову копію гена SEF1 під контролем лактозо індуцибельного промотора LAC4, є ідеальною платформою для розвитку промислового виробництва рибофлавіну на побічному продукті молочної промисловості - сироватці. Ключові слова: ДРІЖДЖІ Candida famata, Scheffersomyces stipitis РЕГУЛЯЦІЯ ПРОДУКЦІЇ РИБОФЛАВІНУ, ТРАНСКРИПЦІЙНИЙ ФАКТОР Sef1 , ПРОМОТР LAC4

Опис продукції

Автори роботи

Андреєва Юлія Андріївна
Бандура Юрій Олександрович
Дзанаєва Любов Сергіївна
Дмитрук Костянтин Васильович
Петровська Яна Олександрівна
Фаюра Любов Романівна
Федорович Дарія Василівна
Царук Аксинія Юріївна
Цирульник Андрій Олександрович

Додано/оновлено в НРАТ

2022-03-09