Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0223U004829, 0120U104795 , Науково-дослідна робота Назва роботи Сайт-спрямований мутагенез як інноваційний підхід для дослідження механізмів виникнення та подолання резистентності Mycobacterium tuberculosis до антибіотиків Назва етапу роботи Керівник роботи Ярмолюк Сергій Миколайович, Доктор хімічних наук Дата реєстрації 05-12-2023 Організація виконавець Інститут молекулярної біології і генетики Національної академії наук України Опис етапу Вперше отримано дві мутовані форми МетРС M. tuberculosis – Q24A та L293A. Досліджено інгібітори дикої форми МетРС M. tuberculosis, що були розроблені нами в процесі реалізації проєкту, на мутованих формах. Виявлено, що досліджувані мутації призводять до втрати ефективності інгібіторів. Це свідчить про те, що інгібітори дійсно взаємодіють із аміноацил-аденілат зв’язувальним сайтом. Проведено біохімічний скринінг 93 сполук на інгібувальну активність щодо МетРС M. tuberculosis, серед яких знайдено 4 нові інгібітори, що пригнічують активність синтетази більше, ніж на 50% при концентрації 100 μМ. Проведено in silico сайт-спрямований мутагенез амінокислотних залишків у синтетичному сайті ЛейРС M. tuberculosis та розраховано вільні енергії зв’язування субстрату із мутантними формами ЛейРС. За результатами моделювання молекулярної динаміки відібрано два амінокислотні залишки для експериментально сайт-спрямованого мутагенезу – His89 та Ile697. Отримано дві мутовані форми ЛейРС – H89A та I697A. Було встановлено, що ці амінокислотні залишки є важливими для взаємодії із деякими інгібіторами ЛейРС M. tuberculosis, що були розроблені нами в процесі реалізації проєкту. Проведено біохімічний скринінг 50 сполук на інгібувальну активність щодо ЛейРС M. tuberculosis, серед яких знайдено 25 нових інгібіторів, що пригнічують активність синтетази більше, ніж на 50% при концентрації 100 μМ. Серед них знайдено 4 інгібітори, що проявляють подвійну інгібувальну активність щодо ЛейРС і МетРС M. tuberculosis. Три із цих сполук належать до похідних бензо[b]оксепін-4-карбоксильної кислоти(5-бензил-тіазол-2-іл)-аміду і одна – до похідних 1-оксо-3-феніл-ізохроман-6-карбоксильної кислоти бензотіазол-2-іламіду. Опис продукції Автори роботи Додано в НРАТ 2023-12-05 Закрити