Реєстраційний номер
0223U005353,
0123U103550
, Науково-дослідна робота
Назва роботи
Механізми специфічної аутофагійної деградації органел та цитозольних ферментів у дріжджах як модельна система захворювань людини
Назва етапу роботи
Керівник роботи
Сибірний Андрій Андрійович, Доктор біологічних наук
Дата реєстрації
20-12-2023
Організація виконавець
Інститут біології клітини Національної академії наук України
Опис етапу
Розробка нових підходів до вивчення механізмів деградації пероксисом та цитозольних білків у метилотрофних дріжджах K. phaffii, а також дослідження механізмів деградації як гомо-, так і гетерологічних білків створює передумови для побудови ефективних продуцентів цільових білків на основі дріжджів.
Система селекції з використанням химерного білка β-галактозидази-GFP дозволяє досліджувати процеси деградації цитозольних білків ширшим спектром методів: біохімічне визначення активності фермента β-галактозидази та візуальне визначення за рахунок флуоресцентної мітки GFP дозволяють з’ясувати, у яких компартментах клітини відбуваються процеси розщеплення цього білка.
Для розробки продуцентів білків, які мають промисловий інтерес, мінімізація рівня деградації цільового білка в цитозолі має вирішальне значення. Fld1 і Fdh1 служать зручними модельними білками для вивчення деградації цитозольних білків у метилотрофних дріжджах. Це пояснюється їх участю в утилізації метанолу. Метанол окислюється до формальдегіду за допомогою AOX, який потім перетворюється на форміат за допомогою Fld1, і, нарешті, Fdh1 каталізує окислення форміату до вуглекислого газу. Специфічна активність Fld1 і Fdh1 швидко знижується при перенесенні метилотрофно вирощених клітин на середовище з глюкозою. В результаті проведених експериментів було показано, що деградації Fld1 та Fdh1 відбувається за вакуолярним шляхом і створено платформу для конструювання ефективних продуцентів гетерологічних білків, які мають велике біотехнологічне значення.
Опис продукції
Автори роботи
Дмитрук Костянтин Васильович
Дмитрук Олена Валеріївна
Додано/оновлено в НРАТ
2023-12-20
