Реєстраційний номер
0224U002967,
(0122U002453)
, Науково-дослідна робота
Назва роботи
Комбіноване застосування дендритних клітин та фотоконтрольованих аналогів природних цитотоксичних пептидів для імунотерапії злоякісних новоутворень
Назва етапу роботи
Дослідити фенотипові та функціональні властивості дендритних клітин, навантажених лізатом пухлинних клітин, одержаним під дією фотоконтрольованих цитотоксичних пептидів
Керівник роботи
Храновська Наталя Миколаївна, к.б.н.
Дата реєстрації
19-03-2024
Організація виконавець
Державне некомерційне підприємство "Національний інститут раку"
Опис роботи
Визначити доцільність застосування фотоконтрольованих аналогів природних цитотоксичних пептидів для підвищення протипухлинної та імуномодулюючої активності дендритних клітин в експерименті
Опис етапу
Об’єкт дослідження – фотоконтрольовані аналоги цитотоксичних пептидів, пухлинні клітинні лінії, дендритні клітини. Було розроблено технологію навантаження генерованих in vitro дендритних клітин лізатом пухлинних клітин лінії MDA-MB-231, оброблених цитотоксичними пептидами (ЦП). У дослідженнях використовували 2 ЦП – диарилетенвміщуючі аналоги граміцидина S LMB002 та LMB033, кожний - у закритій та відкритій формах. Визначено що оптимальними концентраціями для LMB002 та LMB033 (як у відкритій, так і закритій формах), є 16 та 32 мкМ, при яких спостерігається загибель пухлинних клітин імуногенним шляхом. Найбільш оптимальним підходом для отримання лізатів пухлинних клітин є 5 циклів заморожування до мінус 200С та відтаювання при 560С, при якому ми отримали необхідну концентрацію білка для навантаження дендритних клітин. Технологія отримання зрілих дендритних клітин включала в себе навантаження лізатом клітин пухлинної лінії MDA-MB-231, оброблену пептидами LMB033 та LMB002 на 6-ту добу культивування. Концентрація ЦП на 1х107 пухлинних клітин становила 16 або 32 нг/мл, час інкубування становив 6 годин, кількість девіталізованих пухлинних клітин після впливу пептидів становила 90%. Встановлено, що навантаження дендритних клітин лізатами клітин пухлинної лінії MDA-MB-231, оброблених пептидами LMB033 та LMB002, сприяє достовірному збільшенню рівня експресії поверхневого маркера CD83, що свідчить про збільшення ступеню зрілости генерованих дендритних клітин. Однак, слід зазначити, що застосування ЦП викликало різноспрямовану дію на антигенпрезентуючі властивості клітин в залежності від форми пептиду (закрита або відкрита). Нами було встановлено, що закрита форма LMB033 у концентраціях 16 або 32 µМ сприяє збільшенню рівня костимуляторних молекул CD86 та HLA-DR. Тоді, як відкрита форма LMB033 у концентації 32 µМ викликала деяке пригнічення антигенпрезентуючих властивостей дендритних клітин, а саме експресія CD86 та HLA-DR на них була значно нижчою, ніж у клітин в контролі.
Опис продукції
Автори роботи
Горбач Олександр Ігорович
Скачкова Оксана Володимирівна
Додано/оновлено в НРАТ
2024-03-19
