Пошук академічних текстів

Реєстраційний номер

0224U032662, (0124U004350) , Науково-дослідна робота

Назва роботи

Конструювання дріжджових продуцентів гранулоцитарно-макрофагального колонієстимулюючого фактора (ГМ-КСФ), що активує загоєння ран

Назва етапу роботи

Дизайн нуклеотидних послідовностей, що кодують ГМ-КСФ, та конструювання відповідних векторів для експресії як секреторної форми ГМ-КСФ, так і форм для іммобілізації ГМ-КСФ на поверхні дріжджових клітин.

Керівник роботи

Дмитрук Костянтин Васильович, Доктор біологічних наук

Дата реєстрації

29-11-2024

Організація виконавець

Інститут біології клітини Національної академії наук України

Опис роботи

Основною метою проєкту є конструювання продуцентів ГМ-КСФ на основі метилотрофних дріжджів з «гуманізованим» типом глікозилювання білків. Для максимальної продукції ГМ-КСФ будуть оптимізовані умови культивування отриманих продуцентів. Будуть розроблені методи очистки ГМ-КСФ. Додатковою метою є іммобілізація ГМ-КСФ на поверхні клітин дріжджів. Ефективність препаратів ГМ-КСФ та дріжджів, що містять на своїй поверхні цей фактор росту, буде перевірена шляхом стимуляції проліферації клітин лінії TF1.

Опис етапу

Основною метою проєкту є конструювання продуцентів ГМ-КСФ на основі метилотрофних дріжджів Komagataella phaffii та Ogataea polymorpha з «гуманізованим» типом глікозилювання білків. Для максимальної продукції ГМ-КСФ будуть оптимізовані умови культивування отриманих продуцентів. Будуть розроблені методи очистки ГМ-КСФ. Додатковою метою є іммобілізація ГМ-КСФ на поверхні клітин дріжджів. Застосування препаратів клітин з ГМ-КСФ на поверхні клітини міг би суттєво здешевити створення препаратів для лікування опіків. В результаті виконання першого завдання даного проєкту було сконструйовано інтегративні вектори, що містять послідовність синтетичного гена, який кодує людський ГМ-КСФ із врахуванням особливостей кодування дріжджів. Вектори містять сигнал секреції α та якірні послідовності дріжджів S. cerevisiae. Сконструйовано два набори векторів, що містили гомологічні послідовності промоторів гена АОХ для експресії цільового гена у дріжджів K. phaffii та O. polymorpha. Було створено вектори для експресії секреторної форми ГМ-КСФ та варіанту ГМ-КСФ для іммобілізації цього цитокіну на поверхні дріжджової клітини. Сконструйовані вектори будуть використані для отримання відповідних дріжджових трансформантів та їх подальшого аналізу.

Опис продукції

Автори роботи

Дмитрук Олена Валерієвна
Сибірний Андрій Андрійович

Додано в НРАТ

2024-11-29