Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0224U032972, (0124U004210) , Науково-дослідна робота Назва роботи Комплексне дослідження модельних 3D-систем для розкриття механізмів впливу ізоформ CHI3L1 на прогресію гліобластом Назва етапу роботи Створення низькотемпреатурного стоку культур нейронів та макроглії фетального мозку людини та збірка векторної конструкції CRISPR/Cas9 для нокауту транскриптів гена CHI3L1 Керівник роботи Скрипкіна Інесса Яківна, Кандидат біологічних наук Дата реєстрації 13-12-2024 Організація виконавець Інститут молекулярної біології і генетики Національної академії наук України Опис роботи Метою запропонованого проєкту є визначення функціональної ролі ізоформ хітіназо-подібного білка CHI3L1 у розвитку і прогресії гліобластом, вплив на основні клітинні компоненти мікрооточення (макрофаги та нейрони) із застосуванням інноваційних 3D клітинних модельних систем. Опис етапу  В результаті реалізації першого етапу проекту розроблені методики по отриманню життєздатних нейрональних культур клітин з кріозамороженіх тканин фетального мозку людини. Підтверджено, що отримані культури клітини зі зразків тканини фетального мозку людини відповідають фенотипу нейронів і макроглії та можуть бути успішно використані в реалізації подальших експериментальних завдань наступного етапу даного проекту. Створено низькотемпературний банк отриманих культур, у кількості, достатній для подальших етапів роботи. Було розроблено та застосовано стратегію нокауту транскрипційних ізоформ гена CHI3L1 людини за допомогою техніки CRISPR/Cas9 для клітин лінії гліобластоми U-87, де спостерігається висока кількість цього білка. І навпаки, для дослідження впливу цього перспективного в якості мішені для протионкотерапії білка, на клітинах гліобластоми U-251, де його немає, були отримані похідні клітини з надекспресією короткої чи довгої ізоформ CHI3L1. Деривати клітин U-251 з вибірково надекспресованими транскриптами CHI3L1-L та CHI3L1-S були отримані за допомогою лентивірусної/ретровірусної трансдукції. Результати даного етапу в подальшому матимуть вагомий вплив на подальші дослідження та редагування процесів виникнення та прогресії гліобластом. Вони стануть підґрунтям для подальшого вдосконалення моделей пухлин головного мозку, а також для завдань, пов’язаних з редагуванням геному. Опис продукції Автори роботи Анопрієнко Ольга Валентинівна Арешков Павло Олександрович Букреєва Тетяна Василівна Нестеренко Юлія Анатоліївна Рибачук Оксана Андріївна Шлома Анастасія Ростиславівна Додано в НРАТ 2024-12-13 Закрити