Реєстраційний номер
0224U032972,
(0124U004210)
, Науково-дослідна робота
Назва роботи
Комплексне дослідження модельних 3D-систем для розкриття механізмів впливу ізоформ CHI3L1 на прогресію гліобластом
Назва етапу роботи
Створення низькотемпреатурного стоку культур нейронів та макроглії фетального мозку людини та збірка векторної конструкції CRISPR/Cas9 для нокауту транскриптів гена CHI3L1
Керівник роботи
Скрипкіна Інесса Яківна, Кандидат біологічних наук
Дата реєстрації
13-12-2024
Організація виконавець
Інститут молекулярної біології і генетики Національної академії наук України
Опис роботи
Метою запропонованого проєкту є визначення функціональної ролі ізоформ хітіназо-подібного білка CHI3L1 у розвитку і прогресії гліобластом, вплив на основні клітинні компоненти мікрооточення (макрофаги та нейрони) із застосуванням інноваційних 3D клітинних модельних систем.
Опис етапу
В результаті реалізації першого етапу проекту розроблені методики по отриманню життєздатних нейрональних культур клітин з кріозамороженіх тканин фетального мозку людини. Підтверджено, що отримані культури клітини зі зразків тканини фетального мозку людини відповідають фенотипу нейронів і макроглії та можуть бути успішно використані в реалізації подальших експериментальних завдань наступного етапу даного проекту. Створено низькотемпературний банк отриманих культур, у кількості, достатній для подальших етапів роботи.
Було розроблено та застосовано стратегію нокауту транскрипційних ізоформ гена CHI3L1 людини за допомогою техніки CRISPR/Cas9 для клітин лінії гліобластоми U-87, де спостерігається висока кількість цього білка. І навпаки, для дослідження впливу цього перспективного в якості мішені для протионкотерапії білка, на клітинах гліобластоми U-251, де його немає, були отримані похідні клітини з надекспресією короткої чи довгої ізоформ CHI3L1. Деривати клітин U-251 з вибірково надекспресованими транскриптами CHI3L1-L та CHI3L1-S були отримані за допомогою лентивірусної/ретровірусної трансдукції.
Результати даного етапу в подальшому матимуть вагомий вплив на подальші дослідження та редагування процесів виникнення та прогресії гліобластом. Вони стануть підґрунтям для подальшого вдосконалення моделей пухлин головного мозку, а також для завдань, пов’язаних з редагуванням геному.
Опис продукції
Автори роботи
Анопрієнко Ольга Валентинівна
Арешков Павло Олександрович
Букреєва Тетяна Василівна
Нестеренко Юлія Анатоліївна
Рибачук Оксана Андріївна
Шлома Анастасія Ростиславівна
Додано/оновлено в НРАТ
2024-12-13
