Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0225U001090, (0119U103634) , Науково-дослідна робота Назва роботи Молекулярні механізми контролю якості трансляції за участю непротеїнових амінокислот Назва етапу роботи Клонування і експресія в E.coli аланіл-тРНК синтетаз Enterococcus faecalis і людини та вивчення їх редагувальної активності відносно D-аланіну. Керівник роботи Тукало Михайло Арсентійович, Доктор біологічних наук Дата реєстрації 24-01-2025 Організація виконавець Інститут молекулярної біології і генетики Національної академії наук України Опис роботи Метою даного проекту є вивчення структурних і конформаційних детермінант транспортних РНК, лейцил-тРНК ситетази людини та аланіл-тРНК синтетаз із різних джерел, які виключають участь в біосинтезі білка таких непротеїнових амінокислот як норлейцин, норвалін, гомоцистеїн та D-аланін. Механізми стереоспецифічності трансляції генетичної інформації ще зовсім не з'ясовані. Тому буде вивчатись здатність до редагування D-амінокислот АлаРС і ПроРС із різних джерел (E.coli, Enterococcus faecalis та людини) і окремого транс-редагувального фактора - АлаХ. Для виконання роботи буде застосовано комплексний підхід із використанням біохімічних, генно-інженерних, біофізичних та методи молекулярної динаміки і квантово-хімічних розрахунків. Планується дослідження впливу включення норваліну, норлейцину і гомоцистеїну в білки на ріст нормальних та ракових клітин. Результати роботи мможуть бути використані для пошуку нових антибіотиків проти патогенів людини і ліків проти онкологічних захворювань, а також створять підґрунтя для створення нових ортологічних пар тРНК-АРСаза для синтетичної біології. Опис етапу Протягом етапу було підібрано умови експресії аланіл-тРНК синтетази Enterococcus faecalis у клітинах E. coli та її очищення. Також було підібрано умови експресії людської АлаРС та умови очистки. Було відпрацьовано умови очистки транс-редагувального фактора АлаХ із Thermus thermophilus. Було досліджено кінетичні параметри активації споріднених та неспоріднених амінокислот аланіл-тРНК синтетазою T. thermophilus та мутантною формою АлаРС (С666А) E. coli. У випадку АлаРС T. thermophilus також було досліджено реакцію пірофосфатного обміну. Також було отримано кінетичні параметри реакції аміноацилювання для ТирРС T. thermophilus. Опис продукції Автори роботи Гудзера Ольга Йосипівна Коваленко Оксана Петрівна Крикливий Іван Андрійович Раєвський Олексій Володимирович Рибак Марія Юріївна Скиданович Олександра Ігорівна Яремчук Ганна Дмитрівна Додано в НРАТ 2025-01-24 Закрити