Реєстраційний номер
0225U004155,
(0120U102238)
, Науково-дослідна робота
Назва роботи
Структурні і функціональні дослідження факторів елонгації трансляції вищих евкаріотів
Назва етапу роботи
Дослідження функціональної ролі метилування специфічних лізинових залишків ізоформ eEF1A1 і eEF1A2 фактора елонгації трансляції 1А
Керівник роботи
Негруцький Борис Сергійович, Доктор біологічних наук
Дата реєстрації
20-11-2025
Організація виконавець
Інститут молекулярної біології і генетики Національної академії наук України
Опис роботи
Метою роботи є аналіз просторової організації і функціонування групи 1 факторів елонгації трансляції ссавців (eEF1A та мультибілковий комплекс eEF1B). Для досягнення цієї мети планується виконати наступні завдання. По-перше, отримати експериментальні дані, що дозволять побудувати атомарні моделі просторової організації субодиниць трансляційного комплексу eEF1B та архітектури комплексу в цілому. По-друге, провести експериментальні дослідження та побудувати на їх основі модель просторової організації ізоформи 1 фактора елонгації 1А. По третє, визначити потенційне функціональне значення метилування лізинових залишків в молекулі фактора елонгації 1А (eEF1A), зокрема, експериментально перевірити гіпотезу стосовно того, що метилування деяких залишків лізину в eEF1A може впливати на взаємодію цього білка з партнерами, такими як субодиниці комплексу eEF1B, що може розкрити молекулярний механізм нещодавно відкритого впливу метилування eEF1A на онкогенну трансформацію клітин. По четверте, описати молекулярні механізми дії нових інгібіторів eEF1A із потенційним протипухлинним ефектом.
Опис етапу
Об`єкти дослідження –комплекс факторів трансляції людини eEF1B, фактор елонгації трансляції eEF1A, ізоформи eEF1A1 і eEF1A2, фактори елонгації трансляції eEF1Bα, eEF1Bβ, eEF1Bγ.
Мета роботи - розкриття просторової організації трансляційних комплексів та їх компонентів, дослідження потенційної ролі посттрансляційних модифікацій у функціонуванні факторів трансляції.
Методи дослідження – воднево-дейтерієвий обмін із подальшою мас-спектрометрією, аналітичне ультрацентрифугування, мутагенез білків, хроматографічне виділення індивідуальних білків, аналітична гель-фільтрація, система біолюмінесцентного резонансного енергетичного переносу, Вестерн блот, ко-імунопреципітація, ко-преципітація білків, конфокальна мікроскопія, мас-спектрометрія, полімеразна ланцюгова реакція, молекулярно-біологічні методи роботи з ДНК, кінетичні методи, біоінформатичний аналіз, молекулярне моделювання, молекулярний докінг.
Виявлено, що почергова або повна заміна залишків лізину, що метилуються, на аргінін, у онкогенній ізоформі фактора елонгації трансляції eEF1A2 не впливає на її взаємодію з фактором нуклеотидного обміну eEF1B, що дозволяє виключити таку взаємодію із розряду чинників карциногенезу, індукованих мeтилуванням eEF1A2. У той же час показано суттєво знижену взаємодію із eEF1B ізоформи eEF1A1, у якій всі п’ять залишків лізину, що метилуються, замінені на аргінін. Отже, однією із функціональних ролей метилування eEF1A1 може бути вплив на ефективність обміну нуклеотидів в цій молекулі.
Опис продукції
Автори роботи
Новосильна Олександра Валеріївна
Єльська Ганна Валентінівна
Порубльова Лариса Василівна
Лук’яненко Ганна Іванівна
Бондарчук Тетяна Валеріївна
Шалак Вячеслав Федорович
Цуварєв Олександр Юрійович
Колодка Назар Тарасович
Гриців Софія Василівна
Додано/оновлено в НРАТ
2025-11-20
