Реєстраційний номер
0225U004306,
(0124U004350)
, Науково-дослідна робота
Назва роботи
Конструювання дріжджових продуцентів гранулоцитарно-макрофагального колонієстимулюючого фактора (ГМ-КСФ), що активує загоєння ран
Назва етапу роботи
Селекція дріжджових трансформантів та їх аналіз на предмет продукції та локалізації ГМ-КСФ, оптимізація умов культивування отриманих продуцентів, розробка методів очистки ГМ-КСФ та перевірка активності шляхом стимуляції проліферації клітин лінії TF1.
Керівник роботи
Дмитрук Костянтин Васильович, Доктор біологічних наук
Дата реєстрації
28-11-2025
Організація виконавець
Інститут біології клітини Національної академії наук України
Опис роботи
Основною метою проєкту є конструювання продуцентів ГМ-КСФ на основі метилотрофних дріжджів з «гуманізованим» типом глікозилювання білків. Для максимальної продукції ГМ-КСФ будуть оптимізовані умови культивування отриманих продуцентів. Будуть розроблені методи очистки ГМ-КСФ. Додатковою метою є іммобілізація ГМ-КСФ на поверхні клітин дріжджів. Ефективність препаратів ГМ-КСФ та дріжджів, що містять на своїй поверхні цей фактор росту, буде перевірена шляхом стимуляції проліферації клітин лінії TF1.
Опис етапу
У рамках проєкту сконструйовано інтегративні вектори з оптимізованим для дріжджів синтетичним геном людського ГМ-КСФ, що містять сигнал секреції α-фактора та якірні послідовності S. cerevisiae. Створено штами метилотрофних дріжджів, здатні ефективно продукувати секреторні форми ГМ-КСФ, а також штами з поверхнево експонованим цитокіном. Розроблено протоколи очистки рекомбінантного ГМ-КСФ, отримано очищені препарати цільових білків. Секреторні та поверхневі форми ГМ-КСФ протестовано на людській клітинній лінії TF-1, де підтверджено їхню біологічну активність. Отримані результати демонструють ефективність створеної дріжджової платформи для отримання біоактивних форм ГМ-КСФ. За результатами даного проєкту опубліковано дві статті у журналах Scopus із квартилем Q2, подано заявку на корисну модель. Результати проєкту були представлені на міжнародній конференції у вигляді постерної доповіді.
Опис продукції
Автори роботи
Дмитрук Олена Валеріївна
Сибірний Андрій Андрійович
Додано/оновлено в НРАТ
2025-11-28