Пошук академічних текстів

Реєстраційний номер

0225U004554, (0121U109973) , Науково-дослідна робота

Назва роботи

Особливості функціональної активності ізоформ кінази рибосомного білка S6 (S6K1) та молекулярних механізмів її регуляції в нормі та патології

Назва етапу роботи

Аналіз змін в стані ключових сигнальних каскадів залучених до злоякісної трансформації з застосуванням модельних клітин карциноми простати, з диференційною експресією ізоформ S6K1. Дослідження рівня проліферації, міграції, виживаності, впливу специфічних інгібіторів mTOR/S6K, ефективності формування колоній у напіврідкому агарі стабільних клітинних ліній, отриманих на основі клітин карциноми простати з редагованою експресією ізоформ S6K1. Імуногістохімічний аналіз локалізації ER в клітинах з диференційною експресією ізоформ S6K1. Аналіз РНК/білкових комплексів - мРНК кіназ та RBP. Застосування імунопреципітації РНК (RIP) до підтверджених раніше та аналіз розподілу нормальних та мутантних мРНК кіназ (кількісний ПЛР) у визначених клітинах. Аналіз синергізму, антагонізму та компенсаторної дії знайдених RBP специфічних до різних ділянок мРНК S6K.

Керівник роботи

Філоненко Валерій Вікторович, д.б.н.

Дата реєстрації

11-12-2025

Організація виконавець

Інститут молекулярної біології і генетики Національної академії наук України

Опис роботи

Визначення та характеристика особливостей функціональної активності та молекулярних механізмів її регуляції відомих ізоформ кінази рибосомного білка S6K1 – p55, p60, p70, p85 в нормі та за злоякісної трансформації клітин.

Опис етапу

Об’єкт дослідження – ізоформи кінази рибосомного білка S6. Мета роботи – з’ясування особливостей функціональної активності ізоформ кінази рибосомного білка S6 -S6K1 в нормі та за патологій. Методи дослідження – система геномного редагування CRISPR/Cas9 та shРНК інтерференція, аналіз експресії генів методом ПЛР в реальному часі, Вестерн блот аналіз експресії білків та їхнього фосфорилювання, іммуноцитохімія та конфокальна мікроскопія. З’ясовано особливості функціональної активності ізоформ кінази рибосомного білка S6 (S6K1) – р60, р70 та р85 та молекулярних механізмів їхньої регуляції в нормі та патології. З використанням системи геномного редагування CRISPR/Cas9 створено низку стабільних ліній клітин карциноми грудної залози людини різних молекулярних субтипів з диференційною експресією ізоформ S6K1 завдяки яким визначено їхню роль в прогресії пухлинного росту на рівні інвазиї та метастазування. Встановлено, що функціональна активність ізоформ S6K1 в пухлинах різних молекулярних субтипів суттєво відрізняється, а отже це має враховуватись в протипухлинній терапії. Встановлено кореляцію в експресії ізоформ S6K1 в пухлинах різних гістотипів за такими показниками як інвазивність та метастазування. Встановлено та охарактеризовано низку пострансляційних модифікацій залучених до регуляції функціональної активності кінази серед яких метилування, ацетилування та КоАлювання, що визначають субклітину локалізацію та субстратну специфічніть кінази. Встановленно, що КоАлювання є новим механізмом негативної регуляції активності S6K1, що є альтернативним класичному дефосфорилуванню і притаманний не лише S6K1, але і ншім кіназам як то Аврора А. Виявлено зв’язок між КоАлюванням протеїнів та патологічними станами людини серед яких нейродегенеративні та онкологічні захворювання.

Опис продукції

Автори роботи

Юнгін Ольга Сергіївна
Савінська Лілія Олексіївна
Гоцуляк Назарій Ярославович
Гаріфулін Олег Мінірович
Бджола Анна Володимирівна
Тихонкова Ірина Олександрівна
Марцинюк Марко Євгенович
Погрібна Алла Петрівна
Крупська Ірина Володимирівна
Бобик Василь Іванович
Вігонтіна Ольга Григорівна
Маланчук Оксана Миколаївна
Пальчевський Сергій Станіславович
Мазов Андрій Валерійович
Яковенко Людмила Федорівна
Скороход Олександр Миколайович
Хоруженко Антоніна Іванівна
Німенко Ольга Анатолівна

Додано в НРАТ

2025-12-11