Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0225U004721, (0120U102238) , Науково-дослідна робота Назва роботи Структурні і функціональні дослідження факторів елонгації трансляції вищих евкаріотів Назва етапу роботи Дослідження молекулярних механізмів дії нових інгібіторів eEF1A із потенційним протипухлинним ефектом Керівник роботи Негруцький Борис Сергійович, Доктор біологічних наук Дата реєстрації 17-12-2025 Організація виконавець Інститут молекулярної біології і генетики Національної академії наук України Опис роботи Метою роботи є аналіз просторової організації і функціонування групи 1 факторів елонгації трансляції ссавців (eEF1A та мультибілковий комплекс eEF1B). Для досягнення цієї мети планується виконати наступні завдання. По-перше, отримати експериментальні дані, що дозволять побудувати атомарні моделі просторової організації субодиниць трансляційного комплексу eEF1B та архітектури комплексу в цілому. По-друге, провести експериментальні дослідження та побудувати на їх основі модель просторової організації ізоформи 1 фактора елонгації 1А. По третє, визначити потенційне функціональне значення метилування лізинових залишків в молекулі фактора елонгації 1А (eEF1A), зокрема, експериментально перевірити гіпотезу стосовно того, що метилування деяких залишків лізину в eEF1A може впливати на взаємодію цього білка з партнерами, такими як субодиниці комплексу eEF1B, що може розкрити молекулярний механізм нещодавно відкритого впливу метилування eEF1A на онкогенну трансформацію клітин. По четверте, описати молекулярні механізми дії нових інгібіторів eEF1A із потенційним протипухлинним ефектом. Опис етапу Об`єкти дослідження –комплекс факторів трансляції людини eEF1B, фактор елонгації трансляції eEF1A, ізоформи eEF1A1 і eEF1A2, фактори елонгації трансляції eEF1Bα, eEF1Bβ, eEF1Bγ. Мета роботи - розкриття просторової організації трансляційних комплексів та їх компонентів, дослідження потенційної ролі посттрансляційних модифікацій у функціонуванні факторів трансляції. Методи дослідження – воднево-дейтерієвий обмін із подальшою мас-спектрометрією, аналітичне ультрацентрифугування, мутагенез білків, хроматографічне виділення індивідуальних білків, аналітична гель-фільтрація, система біолюмінесцентного резонансного енергетичного переносу, Вестерн блот, ко-імунопреципітація, ко-преципітація білків, конфокальна мікроскопія, мас-спектрометрія, полімеразна ланцюгова реакція, молекулярно-біологічні методи роботи з ДНК, кінетичні методи, біоінформатичний аналіз, молекулярне моделювання, молекулярний докінг. Досліджено дію 14 потенційних інгібіторів фактора елонгації трансляції eEF1A, відібраних методом молекулярного докінгу, на шість ліній ракових клітин людини. Сім сполук проявили інгібіторний ефект, однак значення ІС50 були щонайменше на порядок вищі, ніж у доксорубіцину. Встановлено, що деякі із сполук змінюють внутрішньоклітинну локалізацію актину та пригнічують стимульоване eEF1A формування пучків актинових філаментів, що може вказувати на наявність нового механізму дії інгібіторів eEF1A на клітинному рівні, пов’язаного з регуляцією F-актину. Опис продукції Автори роботи Новосильна Олександра Валеріївна Єльська Ганна Валентінівна Порубльова Лариса Василівна Бондарчук Тетяна Валеріївна Ложко Дмитро Миколайович Шалак Вячеслав Федорович Цуварєв Олександр Юрійович Колодка Назар Тарасович Лисецький Ігор Леонидович Лук`яненко Ганна Іванівна Гриців Софія Василівна Кунцова Марина Василівна Додано в НРАТ 2025-12-17 Закрити