Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0403U001123, Кандидатська дисертація На здобуття к.б.н. Дата захисту 27-03-2003 Статус Запланована Назва роботи Вивчення молекулярно-генетичних механізмів пухлинної прогресії при Ph'-позитивних лейкеміях та їх діагностика Здобувач Дубровська Анна Миколаївна, Керівник Малюта С. С. Опонент Риндич А. В. Опонент Дробот Л. Б. Опонент Соломко О. П. Опис Накопичення вторинних мутаційних змін гена bcr/abl під час прогресії ХМЛ було досліджено на рівні клітинної фізіології (аналізом характеру розподілу актинового цитоскелету у клітинах хворих на ХМЛ та ГЛЛ) та на рівні первинної структури Dbl-кодуючої ділянки гена bcr (аналізом мутацій методом ПДРФ, методом хімічного розщеплення ДНК-ДНК гетеродуплексів, секвенуванням dbl регіонів гена bcr/abl ). Порівняльний аналіз розподілу актину поліморфноядерних лейкоцитах різних донорів дозволив виділити 3 типи клітинного фарбування: 1) дифузійне - до нього відносилися клітини нормальних донорів; 2) кортикальне - характерне для більшості хворих - С. (ХМЛ, бластна криза), Ф. і Я. (ГЛЛ), а також для клітинних ліній К562 та U937; 3) цитоскелетний розподіл третього типу - dot-like - спостерігався лише в одному випадку К. (ХМЛ, бластна криза). Всі медичні діагнози "Ph'-позитивний ХМЛ" та "Ph'-позитивний ГЛЛ" було верифіковано нами методом ЗТ-ПЛР.Аналіз мутацій дозволив у випадку хворого К. встановити трансверсії у Dbl - кодуючому регіоні гена bcr/abl в положенні 2127 ( заміна Т на С), та у положенні 2449 ( трансверсія С - А). Виявлені мутації можуть бути самодостатнім або додатковим фактором пухлинної прогресії.З метою дослідження наявності та рівня експресії нормального білка Bcr нами було проекспресовано, очищено і використано для отримання поліклональних антитіл рекомбінантні Dbl та PH-гомологічні домени білка Bcr. Результати Вестерн-блот аналізу із використанням лізатів клітин хворих на ХМЛ дають змогу зробити припущення 1) про наявність негативного зворотнього зв'язку між ескпресією білків Bcr та Bcr/Abl 2) про існування механізмів регуляції експресії гена bcr/abl на рівні трансляції - у випадку наявності транскриптів та відсутності транслятів гена bcr/abl. Отже, отримані антитіла дають змогу детектувати нормальний білок Bcr і дозволяють розробити комплексний підхід для детекції філадельфійської перебудови . Це забезпечує більш глибокий аналіз молекулярних основ пухлинної етіології, проведення диференціальної діагностики для хворих з підозрою на ХМЛ і прогнозування подальшого перебігу захворювання. Дата реєстрації 2003-03-27 Додано в НРАТ 2020-04-04 Закрити