Search academic texts

Information × Registration Number 0410U000932, Candidate dissertation Status к.б.н. Date 07-04-2010 popup.evolution o Title Metabolic engineering of the nonconventional yeast Candida famata aimed at constructing overproducers of flavin nucleotides Author Yatsyshyn Valentyna Yuriivna, popup.head Fedorovych Dariya Vasylivna popup.opponent Підгорський Валентин Степанович popup.opponent Лущак Володимир Іванович Description Об'єкт дослідження: біосинтез флавінових нуклеотидів у дріжджів і регуляція цього процесу. Мета роботи: розробка підходів до конструювання надсинтетиків ФМН та ФАД на основі флавіногенних дріжджів Candida famata, використовуючи методи метаболічної інженерії. Методи дослідження: мікробіологічні, біохімічні, молекулярно-генетичні, математичної статистики. Вперше клоновано гени FMN1 та FAD1 дріжджів Debaryomyces hansenii. Розроблено схему генно-інженерного конструювання штамів дріжджів, здатних до нагромадження в культуральній рідині ФАД та (або) ФМН. Заміна нативного промотора клонованого гена FMN1 дріжджів D. hansenii на сильний промотор TEF1 C. famata викликає підвищення питомої активності РФ-кінази (до 200 разів) та зростання вмісту ФМН (до 1000 разів) у культуральній рідині рекомбінантних штамів C. famata. Введення гена FAD1 під контролем TEF1 промотора у штам-надсинтетик ФМН призводить до 7-15-кратного зростання питомої активності ФАД-синтетази і накопичення до 450 мг/л ФАД у культуральній рідині. Виявлено компоненти середовища, важливі для нагромадження ФМН та ФАД. Внаслідок оптимізації лише складу середовища культивування вдалося додатково підвищити синтез ФМН у 29-36 разів, а ФАД - у 28,5 раза. Сфери використання: прикладна мікробіологія, біотехнологія, біохімія. Registration Date 2010-04-07 popup.nrat_date 2020-04-04 Close