Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0411U005796, Кандидатська дисертація На здобуття к.х.н. Дата захисту 27-09-2011 Статус Запланована Назва роботи Довгохвильові сквараїнові барвники як флуоресцентні біоаналітичні реагенти. Здобувач Поврозін Євген Анатолійович, Керівник Паценкер Леонід Давідович Опонент Логінова Лідія Павлівна Опонент Єгорова Алла Володимирівна Опис Об екти дослідження: процеси взаємодії сквараїнів та поліметинів з низькомолекулярними та високомолекулярними біоаналітами та пов'язані з цими процесами зміни флуоресцентних характеристик цих барвників. Мета дослідження - підвищення чутливості та достовірності біоаналітичних методів шляхом застосування нових флуоресцентних реагентів на основі довгохвильових сквараїнових барвників. Методи дослідження: електронна абсорбційна та флуоресцентна спектроскопія, фазово-модуляційна спектроскопія часів життя флуоресценції. Теоретичні і практичні результати, новизна: вперше на підставі систематичного аналізу спектрально-люмінесцентних, фотофізичних та фотохімічних властивостей нових довгохвильових сквараїнових барвників, їх нековалентних комплексів та ковалентних кон'югатів з біотином, олігонуклеотидами та протеїнами продемонстровано перспективність сквараїнів як біоаналітичних реагентів для флуоресцентного визначення низькомолекулярних та високомолекулярних біоаналітів, особливо при застосуванні часів життя флуоресценції як параметру вимірювань; на підставі аналізу зв'язку спектральних, фотофізичних та фотохімічних характеристик з молекулярною будовою сквараїнових барвників сформульовано критерії їх відбору для розробки методів флуоресцентного визначення низькомолекулярних та високомолекулярних біоаналітів; вперше запропоновано методологічні підходи до визначення олігонуклеотидів та низькомолекулярних антигенів з застосуванням лише одного, сквараїнового барвника, час життя флуоресценції якого є чутливим до мікрооточення; запропоновано методологічний підхід до визначення низькомолекулярних та високомолекулярних біоаналітів, заснований на вимірюванні часів життя флуоресценції довгохвильових сквараїнових барвників, який на відміну від методів, що використовують флуоресцентний резонансний перенос енергії між двома барвниками (FRET), застосовує тільки один флуоресцентний реагент; новий підхід дозволяє спростити та прискорити проведення аналізу. Ступінь впровадження: сквараїнові барвники K8-1340, K8-1351 та K8-1661 запропоновано як найбільш яскраві, чутливі та стабільні біоаналітичні реагенти. Їх перспективність підтверджено в Інституті молекулярної біології та генетики НАН України (Київ), Інституті проблем кріобіології та кріомедицини НАН України (Харків), а також в компаніях Agilent (США), Tecan (Австрия), ReaMetrix, Inc. (США), Dako (Данія), Luminex Corp. (США), Molecular Devices (США), ISS (США), Edinburgh Instruments (Великобританія), Becton Dickinson (США), Pierce Biotechnology (США), Avanti Polar Lipids, Inc. (США), Glen Research Corp. (США) та ін. Одержані флуоресцентні кон'югати та розроблені методи визначення біоаналітів застосовуються на практиці для кількісного визначення протеїнів; при вивченні взаємодії антигенів з антитілами в імунології; у гібридизаційному аналізі, заснованому на взаємодії комплементарних пар олігонуклеотидів; для одержання біологічних зображень методом флуоресцентної мікроскопії та при вирішенні інших біоаналітичних та медико-біологі­чних завдань. Кон'югати барвників K8-1610 та K8-1660 з пептидами (серія ULight) застосовано компанією PerkinElmer (США, Канада) у комерційних тест-системах LANCE® Ultra для визначення активності ферментів кіназ. Сфера використання: аналітична хімія. Дата реєстрації 2011-09-27 Додано в НРАТ 2020-04-04 Закрити