Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0412U001920, Кандидатська дисертація На здобуття к.б.н. Дата захисту 21-03-2012 Статус Запланована Назва роботи Теоретичне та експериментальне обґрунтування ефективних умов кріоконсервування дріжджоподібних грибів Candida albicans Здобувач Артуянц Анастасія Юріївна, Керівник Висеканцев Ігор Павлович Опонент Білозоров Олексій Павлович Опонент Гордієнко Євген Олександрович Опис Об'єкт дослідження - процеси кріоконсервування та збереження життєздатності і біологічних властивостей дріжджоподібних грибів C.albicans. Мета роботи - розробка та експериментальне обґрунтування ефективних умов кріоконсервування дріжджоподібних грибів Candida albicans. В роботі використовували наступні експериментальні та теоретичні методи: мікробіологічні, кріобіологічні, цитологічні та біохімічні методи; полімеразну ланцюгову реакцію (ПЛР); проточну цитофлуориметрію і скануючу конфокальну мікроскопію; методи математичного моделювання і статистичної обробки отриманих результатів. Апаратура: програмний заморожувач "Cryoson" (Germany); ампліфікатор "Терцик" (ДНК-технологія, Росія); проточний цитофлуоріметр FACS Calibur (BD, USA); лазерний скануючий конфокальний мікроскоп LSM 510 meta (Carl Zeiss, Germany). Проведено теоретичну оцінку залежності значення ефективної швидкості охолодження від процесів внутрішньоклітинного кристалоутворювання при заморожуванні дріжджоподібних грибів C.albicans в розчинах проникаючого кріопротектора ДМСО і отримано експериментальне підтвердження відповідних теоретичних результатів. Розроблено протокол ефективного режиму кріоконсервування дріжджоподібних грибів C.albicans, відповідно до якого суспензії клітин цього мікроорганізму в 5%-них розчинах ДМСО або гліцерину на пивному суслі охолоджують зі швидкістю від 3,5 до 7°С/хв до -40°С з наступним зануренням у рідкий азот. Цей режим забезпечує збереження життєздатності близько 90% клітин. Встановлено, що зберігання грибів C.albicans при стабільній температурі -196°С протягом чотирьох років (термін спостереження) не призводить до додаткової загибелі клітин і забезпечує збереження генетично детермінованих біологічних властивостей грибів C.albicans, які використовують для їх індикації, ідентифікації і є факторами патогенності (асиміляція і ферментація вуглеводів, чутливість до антимікотичних препаратів, адгезивні властивості). Розроблений протокол рекомендовано для застосування в практиці міжнародних, національних та відомчих колекцій і банків мікробних культур. Ефективність розробленої технології кріоконсервування дріжджоподібних грибів C.albicans апробована в умовах Низькотемпературного банку біологічних об'єктів ІПКіК НАН України. Дата реєстрації 2012-03-21 Додано в НРАТ 2020-04-04 Закрити