Search academic texts

Information × Registration Number 0414U000605, Candidate dissertation Status к.б.н. Date 25-02-2014 popup.evolution o Title Method optimization for obtaining of functionally active recombinant proteins in Escherichia coli Author Gorbatiuk Oksana Borysivna, popup.head Kordium Vitaliy Arnoldovich popup.opponent Мацелюх Богдан Павлович popup.opponent Горницька Ольга Володимирівна Description Дисертаційну роботу присвячено розробці та оптимізації методів отримання функціонально активних рекомбінантних білків в E. coli. Як об’єкти для дослідження обрано: МРТ-63, МРТ-83, МРТ-63-83 – білки, використання яких є перспективним для діагностики туберкульозу; SPAA(tr) – розробки субодиничної вакцини проти бешихи свиней; scFv–CBD – біоліганд для хроматографічного очищення цільових антигенів; SPA-CBD, SPA-CBD2, SPA-Cys – біоліганди для хроматографічного очищення IgG; SPA-ВAPmut – генно-інжененрний імунокон’югат для імунохімічних тестів. Із застосуванням модифікованого методу аутоіндукції 8 із 9 досліджуваних білків отримано у препаративних кількостях синтезом в E. coli. Для MPT-83, МРТ-63, MPT-63-83, SPAА(tr), SсFv-CBD, які накопичувались у вигляді бактеріальних тілець включення, розроблені ефективні схеми ренатурації in vitro та підтверджена їх функціональна активність. SPA-CBD, SPA-CBD2, SPA-Cys, SPA-BAPmut отримано в E. coli в розчинній формі. SPA-CBD, SPA-CBD2, SPA-Cys іммобілізовано на хроматографічних носіях. Отримані на їх основі афінні сорбенти використано з метою виділення фракції IgG з сироваток крові та асцитної рідини. Чистота IgG становила >95 %. SPA-BAPmut застосовано як універсальний вторинний імунореагент, що дозволяє виявляти менше ніж 0,2 нг антигену. Registration Date 2014-02-25 popup.nrat_date 2020-04-04 Close