Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0823U102001, Дисертація доктора філософії На здобуття Доктор філософії Дата захисту 26-07-2024 Статус Захищена Назва роботи Визначення індивідуальної сумісності імплантатів в ортопедо-травматологічній практиці Здобувач Лазаренко Гліб Олегович, Керівник Бойко Ігор Васильович Опонент Анкін Микола Львович Опонент Поляченко Юрій Володимирович Опонент Бурʼянов Олександр Анатолійович Рецензент Литвак Олена Олегівна Опис В роботі проаналізовано реакції організму та тканин на ортопедичні імплантати та розглянуто різні методи діагностики та лікування, що базуються на сучасному розумінні його етіології та перебігу. Експериментальна частина роботи складається з двох розділів. В першому розділі дослідження була застосована модифікована модель сенсибілізації на нікель на лабораторних щурах, яка полягала у однократному внутрішньоочеревинному введенні розчину NiSO4 у неповному ад'юванті Фрейнда та двократному внутрішньошкірному введенні бустерних доз NiSO4 у повному ад'юванті Фрейнда для відновлення імунної відповіді. Це дозволило відтворити модель сенсибілізації на Ni. Експеримент проведений на 25 щурах самках, лінії Wistar. Спочатку випадковим чином тварин розподілено на три групи: 1) інтактна група - 6 щурів, яким операцію не виконували; 2) контрольна група - 6 щурів без попередньої сенсибілізацією ад’ювантом Фрейнда до Ni та встановленням Ni-вмісного імпланту; 3) дослідна група - 13 щурів з попередньою сенсибілізацією ад’ювантом Фрейнда до Ni та встановленням Ni-вмісного імпланту. Через 2 тижні після останньої імунізації тваринам контрольної та дослідної групи виконувалась оперативне втручання - імплантація нікелевих пластин. В день проведення імплантації, через 3 та 5 місяців тваринам проводився забір крові для проведення подальших досліджень: отримання зразків лейкоцитів з периферичної крові щурів, дослідження хемокінового профілю у сироватках крові щурів, отримання зразків сироватки крові щурів, отримання зразків IgG із сироватки крові щурів, проведення оцінки вмісту IgG специфічних до білкових комплексів (агрегатів) у сироватках крові щурів. В другому розділі через 5 місяців від імплантації тварин виводили з експерименту. Капсулу та паракапсулярні тканини видалялись для подальшого проведення гістологічного та морфометричного досліджень. Вилучені імпланти віддавали на дослідження методом електронної мікроскопії (СЕМ). З отриманими IgG проводили тестування за допомогою атомно-силової мікроскопії (АСМ). В дослідженні із використанням протокової цитофлурометріїї визначено концентрацію таких цитокінів, не було виявлено суттєвого підвищення показників IFN-γ, IL-4, TNF-α, але було виявлено зростання рівня MCP-1 у дослідних тварин. При проведенні імуноферментного аналізу IgG в контрольній групі та дослідній групі не спостерігається достовірної відмінності між різними термінами забору сироватки, це свідчить про неспецифічне зв’язування IgG із нікелем та сорбентом. Під час гістологічного дослідження доведено розвиток запальної реакції на нікелевий імплант в експерименті, реакції подібні до типу побічних місцевих тканинних реакцій (ALTR) і побічних реакцій на металеві уламки (ARMD). Клітинно-запальна реакція навколо нікелевих імплантів після сенсибілізації та без такої мала інтенсивну інфільтрацію CD44+ клітин і значно меншу появу CD68+ макрофагів та CD3е+ лімфоцитів з наступною закономірністю питомої щільності у стінці капсули. Під час дослідження методом електронної мікроскопії було виявлено корозію імпланту в кожному вилученому зразку, але більш вираженою була в групі тварин з попередньою сенсибілізацією до Ni, з'являються віддалені часточки (Nі), що можна охарактеризувати, як початок руйнації імпланту. Після очищення та розведення до відповідної концентрації IgG наносили на зонд АСМ. Проводились дослідження сили біоадгезивних взаємодій IgG, виділених з сироватки крові реципієнтів, до імплантатів. Дослідження включали контроль нанорельєфу поверхні та спектроскопію сил адгезії чистих АСМ зондів та зондів із білком з індивідуальної проби крові реципієнта. Зондами з нанесеними імуноглобулінами проводили тестування на сумісність матеріалу імплантату з організмом. Значення сили відриву зонду поверхнею імплантату з імуноглобулінами реципієнта вважали за оцінку сумісності матеріалу з організмом. Чим вище було значення сили відриву тим ймовірніше був розвиток реакції на імплантат організмом. Сама реакція організму реалізовувалась як формування сполучної тканини навколо імплантату з втратою функціональних властивостей останнього, з розвитком асептичного запалення в місці встановлення імплантату, у руйнуванні самого імплантату. Спираючись на результати нашого дисертаційного дослідження можна стверджувати, що запропонований метод тестування на основі атомно-силової спектроскопії при кореляції міжмолекулярної взаємодії біомолекул (на зонді АСМ) і конформаційних змін білків, адсорбованих на матеріалах імплантів, є перспективний експресним методом тестування біоматеріалів на сумісність з організмом конкретного реципієнта. Дата реєстрації 2023-12-26 Додано в НРАТ 2024-10-24 Закрити