Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0824U003599, Дисертація доктора філософії На здобуття Доктор філософії Дата захисту 13-12-2024 Статус Запланована Назва роботи Дослідження протигрибкових властивостей нових синтетичних гетероциклічних сполук. Здобувач Процюк Вікторія Володимирівна, Керівник Куцик Роман Володимирович Опонент Климнюк Сергій Іванович Опонент Яковичук Ніна Дмитрівна Опонент Назарчук Олександр Адамович Рецензент Струк Оксана Анатоліївна Опис В ході виконання дисертаційної роботи було проведено скринінг протигрибкових властивостей 335 вперше синтезованих гетероциклічних сполук відносно ізолятів грибів роду Candida spp. з різними рівнями резистентності до антимікотиків. Протигрибковий ефект на азолорезистентні штами проявили близько 107 сполук (31,94 %), на азолочутливі штами – 113 (33,73 %). Проведено порівняльний аналіз хімічної структури встановлених сполук-лідерів з антифунгальною активністю. Сполуки L 95, L 1369 та L 1558 є похідними 3-((1H-1,2,4-тріазол-3-іл)тіо)-піролідин-2,5-діону (3-ТТПД), які в положенні 1 містять 4-R-фенільне кільце з різними замісниками (H, Cl, Br). При короткотривалому (7 днів) впливі речовин L 95 та L 1558 в концентраціях MIC50 на Candida albicans (ATCC MYA-2876) формування резистентності до них не відбувалося (Р=0,116; F<Fкрит.; F=4,000; Fкрит.=7,709). Встановлено, що змін концентрацій MIC досліджуваних сполук відносно штамів з активними генами резистентності чи пригніченими не спостерігалося, на відміну від зміни MIC для флюконазолу (MIC FCZ відносно штамів з пригніченими генами – 0,8- 6,25 мкг/мл, MIC FCZ відносно штамів з активними генами – 50-100 мкг/мл). На панелі, сформованій із 10 штамів C. albicans одиночними мутаціями та 90 штамів з подвійними мутаціями в генах 10 різних трансмембранних ефлюксних помп, продемонстровано, що деактивація різних ефлюксних помп не впливає на чутливість до похідних 3-ТТПД, зокрема до сполуки L 95. Отже, похідні 3-ТТПД не впливають на шляхи біосинтезу ергостеролу і не є субстратами для відомих ефлюксних помп C. albicans. Уперше встановлено достовірну синергічну протигрибкову взаємодію досліджуваних похідних 3-ТТПД з флюконазолом на рівні фунгістатичного ефекту відносно азолорезистентних штамів кандид. Середні значення кратності зниження MIC50 флюконазолу для FLUC-S штамів Candida albicans в присутності 1/4 – 1/16 MIC сполуки L 95 становили (3,0±0,5) – (5,0±1,5), сполуки L 1369 – (12,0 ± 2,0) – (16,0 ± 0,03), сполуки L 1558 – 1,0 ± 0,25. У FLUC-R штамів Candida spp. спостерігається достовірно (P < 0,01) більша кратність зниження MIC50 флюконазолу при його комбінації із сполукою L 95. Похідні 3-ТТПД також потенціюють антифунгальну дію каспофунгіну у Candida albicans (кратність зниження МІС90 і МІС50 у 2-4 рази). Встановлено, виразний вплив похідних 3-ТТПД на біологічні властивості кандид, асоційовані з їх вірулентністю. Під дією сполук L 95 та L 1558 в концентраціях MIC відповідно 96,0 ± 0,30 % і 89,02 ± 0,5 % клітин колекційного штаму C. albicans ATCC MYA-2876 втрачали здатність до філаментації (процесу переходу грибкових клітин з форми бластоспор у ниткоподібну форму). В присутності даних сполук розмір ростових трубок тест-штаму зменшувався на 68-82 % (P < 0,001). У фунгістатичних і субфунгістатичних концентраціях похідні 3-ТТПД виразно впливають на різні етапи процесу біоплівкоутворення, що найкраще проявляється на високоадгезивних штамах Candida spp. Вплив на адгезивні властивості штаму C. tropicalis був значно менш виражений. Тільки речовина L 1369 в концентрації 20 мкг/мл знижувала показники адгезії C. tropicalis: СПА на 36,17 ± 0,98 %, ІАМ на 27,12 ± 0,91 % і КА на 12,5 ± 0,67 % (P<0,05). В усьому дослідженому діапазоні концентрацій речовини L 1369 та L 95 пригнічували утворення біоплівок штамом C. albicans (ATCC MYA-2876) на полімерному матеріалі. За умови дії речовини L 1369 пригнічення біоплівкоутворення відбувається на 48,33-50,43 % (P < 0,05), при дії речовини L 95 – на 55,64-57,5 % (P < 0,05). Проте похідні 3-ТТПД не володіють здатністю руйнувати уже сформовані біоплівки C. albicans. (P < 0,05). Результати токсикологічного аналізу in silico за допомогою програмного забезпеченням GUSAR-online дозволяють віднести досліджені похідні 3-ТТПД до малотоксичних і практично нетоксичних речовин (V класу токсичності при внутрішньоочеревному та IV класу токсичності – при пероральному введенні). Експериментально перевірено токсичний ефект похідних 3-ТТПД в культурі людських ембріональних клітин нирок HEK-293 та нематод C. elegans. Сполуки L 95 та L 1558 в концентраціях MIC50 майже не проявляють токсичного ефекту, про що свідчить відсутність посиленого виділення ЛДГ в позаклітинне середовище (% цитотоксичності - 1,6 ± 0,35% та 12,63 ± 2,61% відповідно, контроль - 2,86 ± 0,01 %). Експозиція із сполуками L 95 і L 1558 в концентраціях MIC50 впродовж 24-48 год. не чинить токсичного ефекту на інтактні організми нематод Caenorhabditis elegans. Ключові слова: тіазолідини, гетероциклічні сполуки, протигрибкова активність, гриби роду Candida spp., 1,2,4-тріазол-3(5)-тіол, піролідин-2,5-діон, збудники опортуністичних мікозів, протигрибкові препарати, антифунгальна резистентність, кандидоз, біологічна активність. Дата реєстрації 2024-12-17 Додано в НРАТ 2024-12-17 Закрити