Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0212U004405, 0110U002250 , Науково-дослідна робота Назва роботи Розробка основних критеріїв застосування кремнеземних сорбентів з біоімітуючими лігандами-барвниками для одержання діагностичних та терапевтичних білкових препаратів Назва етапу роботи Керівник роботи Даниш Тарас Васильович, Дата реєстрації 09-02-2012 Організація виконавець Державна установа "Інститут патології крові та трансфузійної медицини Національної академії медичних наук України" Опис етапу Об'єкти дослiдження: фракції плазми крові за Коном, афінні кремнеземні сорбенти, препарати протеїназ з плазми крові. Мета роботи: створити набори біоспецифічних сорбентів на основі макропористих кремнеземних матриць, придатних для швидкого аналізу та очищення білків з різноманітного біологічного матеріалу. Мета річного етапу: дослідити алгоритми застосування одержаних сорбентів для аналізу та розділення білкових факторів біологічних рідин. Методи: хімічний синтез, фракціонування, афінна та гель-проникна хроматографії, центрифугування, ПААГ- електрофорез та ін. У результаті виконання роботи одержані наступні науково- практичні результати: проведені порівняльні дослідження властивостей кремнеземних сорбентів та сорбентів на основі матриці Toyopearl, визначені умови застосування одержаних сорбентів для аналізу та розділення білкових факторів біологічних рідин, досліджена естеразна активність факторів згортання крові у субфракціях плазми крові з використанням специфічних хромогенних субстратів, проведений порівняльний аналіз білкових фракцій біологічних рідин, одержаних після барвник-лігандної хроматографії. Ступінь впровадження: лабораторний регламент застосування біоімітуючих сорбентів у протеомному аналізі, доповіді на міжнародних наукових форумах, публікації в науковій літературі, РК технології. Галузь застосування: станції переливання крові, хіміко-фармацевтичні підприємства, науково-дослідні організації. Ефективність: поєднання біоспецифічної хроматографії з іншими методами полегшать дослідження протеоміксу та метаболому. Біоімітуючі сорбенти можуть бути використані у технологіях виділення та очищення білкових факторів, в тому числі рекомбінантних. Опис продукції Коагулологічні методи, які використовуються в клініці для виявлення коагулопатій, непридатні для застосування в процесі технологічних процедур очистки факторів, оскільки наявність високих концентрацій солей, поверхнево-активних речовин, полярних розчинників, речовин для хімічної вірусної інактивації заважають проведенню визначення. Так, підвищена концентрація етанолу чи ізо-пропанолу негативно впливають на хід реакції фібриноутворення. Для розв'язання цієї проблеми застосовували комерційно доступні хромогенні пептидні субстрати фірм Chromogenix та Pentapharm S-2765 (Z-D-Arg-Gly-Arg-pNA · 2HCl) - для прямого визначення активності фактора Xа та для двохстадійного (після активації тромбопластином) визначення фактора VII. Для переведення фактора Х в активну форму застосовували активатор з отрути гюрзи Рассела (Russell's Viper). Використання S-2765 для визначення активності фактора VIII в концентратах факторів проводиться в присутності інгібітора тромбіну I-2581. Активність фактора ІХ визначали за швидкістю Автори роботи Вороняк М.І. Вус М.М. Даниш Т.В. Дульцева Н.А. Дяків Х.І. Мадич С.Є. Орлова Л.В. Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити