Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0216U000712, 0111U006106 , Науково-дослідна робота Назва роботи Дослідження молекулярно-генетичного поліморфізму Dhn, Sbf та інших генів ячменю, повязаних зі стійкістю до несприятливих температурних умов Назва етапу роботи Керівник роботи Файт Віктор Іванович, Дата реєстрації 19-02-2016 Організація виконавець Селекційно-генетичний інститут - Національний центр насіннєзнавства та сортовивчення Опис етапу Об’єкт дослідження - молекулярно-генетичний поліморфізм геному ячменю Hordeum vulgare L. Мета дослідження - дослідити поліморфізм ДНК-локусів ячменю, пов’язаних з відповіддю на несприятливі температурні умови для розробки складових маркерної системи добору стійких генотипів за певним поєднанням алельних варіантів досліджених генів. Методи дослідження - лабораторні, аналіз даних за допомогою комп’ютерних програм. Використовували виділення ДНК за допомогою ЦТАБ, виділення тотальної РНК, синтез кДНК шляхом зворотної транскрипції, ампліфікація ДНК шляхом ПЛР (Терцик, Росія), ПЛР у реальному часі (iCycler iQ5, Bio-Rad), електрофорез продуктів ПЛР в агарозних і поліакриламідних гелях, ком’ютерні програми GeneFISHER, GraphPad Prism5, Blast. Одержано алельні характеристики сортів ячменю селекції СГІ та інших оригінаторів за генами/локусами, пов’язаними зі стійкістю до несприятливих температурних умов: для 51 сорту ячменю - за локусом Dhn5, для 39 сортів за локусами Blt4.9, Blt14 pAF93, pAО29, РА986, Соr14b, Wcs 120.1, Dhn1, Dhn2, Dhn3, Dhn4, Dhn7, Dhn9, Cbf4B, Cbf 12, Hva1, ген-основаними мікросателітними локусами (EST-SSR) Hv_gene-SSR24 (Dhn4), Hv_gene-SSR13 (Cbf10B) Hv_gene-SSR21 (Cbf4A), які беруть участь у формуванні НТ-стійкості, за локусами Dhn3, MGB318, Leа, що впливають на посухостійкість. Визначено алельний стан Vrn- і Ppd-Н1-локусів у 20 сортів озимого ячменю і дворучок селекції СГІ. Встановлено наявність поліморфізму в екзоні 1 гену Dhn4 і екзоні 1 гену Dhn7 у досліджених сортів ячменю, що є однією з причин, які призводять до зміни низькотемпературної чутливості. Виявлено поліморфізм в регуляторній зоні гену Dhn5, що детектується ПЛР-аналізом і може впливати на роботу факторів транскрипції і генну експресію під час стресу. Встановлено відмінності в алельному стані Hva1 (цільового гену чинника транскрипції CBF2) у генотипів, контрастних за низькотемпературною чутливістю. Перспективним є використання показників рівня експресії генів, зокрема Dhn5, як маркерів низькотемпературної стійкості. Поліморфізм за локусом Hva1 забезпечує ефективну детекцію озимих і дворучок або ярих генотипів в загальній вибірці сортів. За результатами роботи розроблено патент на корисну модель «Спосіб детекції, диференціації і ідентифікації ярого та озимого ячменю», науково-методичний посібник «Молекулярні маркери у розвитку теорії і практики селекції ячменю», складено проміжні і заключний звіти. Ефективність впровадження результатів наукових досліджень на рівні навчального процесу ВИШу: науково-методичний посібник впроваджено у навчальний процес кафедри генетики та молекулярної біології ОНУ імені І.І. Мечникова для підготовки студентів до практичних занять з курсу «Молекулярні маркери». Сфера (галузь) використання – сільське господарство (рослинництво при аналізі генотипів ячменю), освіта (вищі навчальні заклади біологічного і сільськогосподарського напрямів), професійна наукова та технічна діяльність (дослідження й експериментальні розробки у сфері біотехнологій). Опис продукції ДНК-маркери до локусів/генів, що пов’язані зі стійкістю генотипів ячменю до несприятливих температурних умов. Систематизований теоретичний огляд інструментів (методів) аналізу генетичного різноманіття ячменю та їх практичне використання для молекулярного маркування генів стійкості до абіотичних стресів. Поліморфізм за локусом Hva1 забезпечує спосіб ефективної детекції ярого або озимого ячменю і дворучок в загальній вибірці сортів. Аналіз поліморфізму локусів Dhn4/Dhn7, Dhn5 може бути використаний як складова частина скринінгу низькотемпературної стійкості генотипів. Автори роботи Бальвінська Марина Сергіївна Файт Віктор Іванович Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити