Реєстраційний номер
0216U001135,
0113U002151
, Науково-дослідна робота
Назва роботи
Дослідити на генетичному та епігенетичному рівнях ознаки прогресії нейробластоми та визначити нові маркери прогнозу перебігу захворювання у дітей.
Назва етапу роботи
Керівник роботи
Храновська Наталя Миколаївна,
Дата реєстрації
25-01-2016
Організація виконавець
Національний інститут раку
Опис етапу
Об'єкт дослідження - біологічний матеріал 91 хворого з верифікованим діагнозом нейробластома. Мета роботи - визначити нові прогностичні маркери перебігу нейробластоми на основі дослідження генетичних та епігенетичних факторів, задіяних в механізмах патогенезу пухлини. Методи дослідження - молекулярно-генетичні, цитогенетичні, морфологічні, біохімічні, статистичні. Апаратура - прилади для проведення ПЛР з детекцією результатів в режимі реального часу 7300/7500 Real-Time PCR Systems фірми "Applied Biosystems", США; проточний цитофлюориметр FACS Сalibur "Becton Dickinson", США; флуоресцентний мікроскоп Imager.M1 "Axio Zeizz", Німеччина; спектрофотометр "NanoDrop-1000" фірми "Thermo Scientific", США; ваги WPS, центрифуга ОПН3-УХЛ. Встановлено, що втрата ділянки хромосоми 17р, де розташовується ген ТР53, зустрічається лише у 2,5 % пацієнтів з нейробластомою (НБ). В той же час, порушення функціонування сигнального шляху p53/MDM2 було виявлено у 53 % пацієнтів за рахунок гіперекспресії гена MDM2, що є негативним регулятором активності р53. Встановлено, що підвищений рівень експресії гена MDM2 асоціюється з несприятливим перебігом НБ та зниженням показника безрецидивної виживаності пацієнтів незалежно від стадії захворювання та статусу гена MYCN. Показник 3-річної безрецидивної виживаності хворих з високою експресією гена MDM2 становить лише 12 %, тоді як у пацієнтів з низькою експресією даного гена - 66 %. Делеція ділянки хромосоми 11q23 в пухлинних клітинах зустрічалася у 20 % пацієнтів з НБ та асоціювалася з відсутністю апліфікації гена MYCN та в одному випадку з наявністю делеції короткого плеча 17 хромосоми. Хворі на НБ з наявністю делеції хромосоми 11q23 без ампліфікації гена MYCN характеризувалися несприятивим прогнозом перебігу захворювання. Встановлено, що рівень експресії мікроРНК miR-380-5p не має самостійного впливу на клінічну поведінку НБ, тоді як низький рівень експресії мікроРНК miR-885-5p, miR-380-5p та miR-137 асоціюється з несприятливим перебігом захворювання. Так, низький рівень екпресії miR-885-5p, miR-380-5p та miR-137 в пухлинних клітинах НБ корелюють з наявністю ампліфікації гена MYCN, високим рівнем експресії гена MDM2 та достовірно частіше зустрічаються у пацієнтів з III-IV стадіями НБ, ніж у хворих з І-ІІ стадіями. Крім того, низький рівень екпресії miR-137 було виявлено у 73 % хворих на НБ. У 21,3 % пацієнтів з НБ виявлено відсутність експресії гена рецептора ретиноєвої кислоти RARB2 в пухлинних клітинах. Встановлено, що рівень експресії гена RARB2 достовірно вищий у пухлинах з наявністю ампліфікації гена MYCN порівнянні з пухлинами, що характеризуються нормальним статусом гена MYCN. Роль функціонального стану гена RARB2 для прогнозування перебігу нейробластоми потребує подальшого вивчення. Одержані результати свідчать про те, що порушення фукціонування сигнального шляху p53-MDM2 за рахунок гіперекспресії гена MDM2, а також зниження експресії мікроРНК miR-885-5p, miR-137 та miR-380-5p асоціюється з несприятливим перебігом НБ. Вищезазначені маркери можуть бути рекомендовані для включення до молекулярно-генетичного компоненту системи стратифікації хворих на НБ за групами ризику.
Опис продукції
Досліджено генетичні та епігенетичні зміни в пухлинних клітинах нейробластоми. Встановлено, що підвищений рівень експресії гена MDM2, низький рівень експресії мікроРНК miR-885-5p та miR-137 та наявність делеції хромосоми 11q23 без ампліфікації гена MYCN в пухлинних клітинах нейробластоми асоціюється з несприятливим перебігом захворювання та зниженням показника безрецидивної виживаності пацієнтів.
Автори роботи
Іномістова М.В.
Горбач О.І.
Свергун Н.М.
Скачкова О.В.
Храновська Н.М.
Додано/оновлено в НРАТ
2020-04-02
