Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0219U001211, 0115U001360 , Науково-дослідна робота Назва роботи Механізми деградації пероксисомних та цитозольних білків у метилотрофних дріжджів та створення надпродуцентів білків промислового значення на основі мутантів з пошкодженням цих механізмів Назва етапу роботи Керівник роботи Сибірний Андрій Андрійович, Доктор біологічних наук Дата реєстрації 18-01-2019 Організація виконавець Iнститут біології клітини НАН України Опис етапу Показано, що тривалість інкубації клітин на метанолі не має особливого впливу на інактивацію фермента. Ефект протеосомного інгібітора MG132 був незначний. Катаболітна інактивація цитозольних і пероксисомних ферментів пошкоджена в ?gss1 мутанта, оскільки пошкоджене сигналювання глюкозою. Досліджено деградацію фруктозо-1,6-бісфосфатази методом Western-blot аналізу у штамах GS200, SMD1163 та ?gss1. Показано, що фруктозо-1,6-бісфосфатаза деградує вакуолярним шляхом незалежно від тривалості індукції метанолом, що корелює з даними по активності цього фермента. Сконструйовано плазміди для експресії генів, що кодують Fbp1 K. phaffii (або E. coli) злиті з зеленим флуоресцентним білком GFP і плазміди, які містять ген, що кодує червоний флуоресцентний білок RFP з PTS1 сигналом, для мічення пероксисом. За допомогою цих плазмід на основі штамів GS200, pex3? і SMD1163 отримано мутанти K. phaffii, які використовуються для аналізу за допомогою флуоресцентної мікроскопії для підтвердження вакуолярного шляху деградації фруктозо-1,6-бісфосфатази у K. phaffii. Опис продукції Сконструйовано плазміди для експресії генів, що кодують Fbp1 K. phaffii (або E. coli) злиті з зеленим флуоресцентним білком GFP і плазміди, які містять ген, що кодує червоний флуоресцентний білок RFP з PTS1 сигналом, для мічення пероксисом. За допомогою цих плазмід на основі штамів GS200, pex3 і SMD1163 отримано мутанти K. phaffii, які використовуються для аналізу за допомогою флуоресцентної мікроскопії для підтвердження вакуолярного шляху деградації фруктозо-1,6-бісфосфатази у K. phaffii. Автори роботи Дмитрук Олена Валеріївна Семків Марта Віталіївна Сибірний Андрій Андрійович Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити