Реєстраційний номер
0219U001574,
0116U002409
, Науково-дослідна робота
Назва роботи
Розробити та обгрунтувати доцільність застосування сучасних нано- та клітинних технологій для підвищення протипухлинної та імуномодуляторної властивостей вакцин на основі дендритних клітин
Назва етапу роботи
Керівник роботи
Храновська Наталя Миколаївна,
Дата реєстрації
07-02-2019
Організація виконавець
Національний інститут раку
Опис етапу
Об'єкт дослідження - дендритні клітини, магнітний нанокомплекс, біодеградабельні наночастинки, протипухлинні вакцини; експериментальні пухлинні процеси. Мета роботи -з використанням сучасних нано- та клітинних технологій підвищити протипухлинну та імуномодуляторну властивості вакцин на основі дендритних клітин, дослідити їх біологічні властивості та обґрунтувати доцільність використання у протипухлинній імунотерапії. Методи дослідження - методи експериментальної онкології, метод культури клітин, цитофлюориметричні, імунологічні, молекулярно-генетичні, статистичні. Встановлено, що дендритні клітини (ДК), генеровані з моноцитів хворих на злоякісні новоутворення відносяться до клітин середнього ступеня зрілості та експресують підвищений рівень мРНК імуносупресивних цитокінів TGF-?, IL-10 та ферменту IDO, характеризуються зниженою здатністю до продукції біоактивного IL-12. Комбінація ЛПС+IFN-?сприяє Тх1- поляризації генерованих ДК, не індукуючи при цьому їхні толерогенні властивості. Встановлено, що екстракт цитоплазматичних мембран (ЕЦМ) St. Aureus Wood 46 сприяє достовірному посиленню експресії молекул CD86 та HLA-DR на генерованих ДК та зниженню їхньої фагоцитарної активності. Комбінація IFN-? та ЕЦМ сприяє підвищенню рівнів експресії мРНК Тх1-поляризуючих цитокінів та збільшенню рівня експресії CCR7, що свідчить про зростання міграційної активності ДК та здатності ініціювати імунну відповідь.Розроблено технологію одержання магнітного нанокомплексу (МНК), яка включає механічну обробку ліофілізованих пухлинних клітин та наночастинок (НЧ) оксиду заліза Fe2O3 у мікровібромлині ММVE-0,005.Визначено найбільш оптимальну концентрацію НЧ оксиду заліза для навантаження генерованих ДК, яка становить 8*10-12 г/мл та розроблено методику цитологічного забарвлення генерованих ДК за методом Ліллі. Створено нові протипухлинні вакцини на основі ДК миші та МНК із застосуванням клітин саркоми 37 або карциноми легені Льюїс. У мишей з карциномою Льюїс вплив ДК-вакцини та магнітного поля сприяв значному зниженню рівня мРНКIL-4, підвищенню рівня мРНК IFN-?, зниженню рівня експресії мРНК TGF-? та FoxP3 у селезінці та лімфатичних вузлах. Протипухлинний ефект ДК, навантажених МНК, асоціювався із суттєвим зниженням рівня експресії мРНК FoxP3 та IL-10 в клітинах лімфатичних вузлів та деяким збільшенням їхнього розміру у мишей з саркомою 37. Розроблено технологію отримання НЧ із сополімерів молочної та гліколевої кислот (PLGA) та лізату пухлинних клітин. У результаті навантаження PLGA-НЧ у ДК людини зростав рівень експресії молекул костимуляції CD86, HLA-DR, HLA-ABC та маркера зрілості CD83 на 15-20 %, що свідчить про їх стимулюючий вплив на дозрівання ДК.
Опис продукції
Автори роботи
Іномістова М.В.
Горбач О.
Скачкова О.В.
Храновська Н.М.
Додано/оновлено в НРАТ
2020-04-02
