Звіт по науково-дослідній роботі. Ситюк Микола Петрович. Експериментальне обґрунтування удосконалення засобів лабораторної діагностики африканської чуми свиней

Інформація × Реєстраційний номер 0223U001312, 0121U108464 , Науково-дослідна робота Назва роботи Експериментальне обґрунтування удосконалення засобів лабораторної діагностики африканської чуми свиней Назва етапу роботи Керівник роботи Ситюк Микола Петрович, Дата реєстрації 27-01-2023 Організація виконавець Інститут ветеринарної медицини Національної академії аграрних наук України Опис етапу Для детекції ДНК вірусу АЧС було вирішено використати рекомендовані МЕБ праймери до цільової консервативної ділянки гену B646L розміром 250 пар нуклеотидів (п. н.), що кодує білок P72. В таблиці представлена нуклеотидна послідовність та характеристика обраних праймерів і флуоресцентних зондів. За вивчення впливу методів виділення ДНК із біологічних матеріалів на відтворюваність та чутливість реакції ПЛР із використанням праймерів для внутрішнього контролю виділення було встановлено, що аналітична чутливість діагностичного набору за концентрації 1,0×107 – 1,0×101 копій/см3 складала 100 %. При дослідженні матеріалу, що містив віруси РРСС, ЦВС-2 та хв. Ауєскі, хибних результатів і неспецифічних реакцій зі сторонніми вірусами не спостерігалось, тобто специфічність реакції становила 100 %). Отримані дані також свідчать про високу збіжність результатів якісного виявлення ДНК вірусу АЧС. У результаті проведених досліджень нами було підібрано оптимальний склад реакційної суміші: 10× Taq Буфер з (NH4)2SO4, 2,5 мМ MgCl2, 4 мМ кожного із дНТФ, 1 Од Taq ДНК-полімерази, 1 Од ревертази. Опис продукції Автори роботи Додано/оновлено в НРАТ 2023-01-27 Закрити