Дисертація доктора філософії. Оліфіренко Олексій Іванович. Використання регенеративних технологій в лікуванні остеоартриту

Реєстраційний номер

0823U100634, Дисертація доктора філософії

На здобуття

Доктор філософії

Дата захисту

25-10-2023

Статус

Захищена

Назва роботи

Використання регенеративних технологій в лікуванні остеоартриту

Здобувач

Оліфіренко Олексій Іванович,

Керівник Мовчан Олександр Степанович
Опонент Кваша Володимир Петрович
Опонент Страфун Олександр Сергійович
Рецензент Радомський Олександр Анатолійович
Рецензент Шуба Володимир Йосипович

Установа, організація, у вченій раді якої відбудеться/відбувся захист

Національний університет охорони здоров'я України імені П. Л. Шупика

Опис

В першому розділі дослідження була застосована модель остеоартриту на лабораторних кролях, яка полягала у одночасному формуванні хрящового дефекту, пересічення передньої схрещеної зв’язки та резекції медіального меніска. Це дозволило відтворити стандартизовану модель захворювання та викликати швидке, топографічно та морфометрично типове пошкодження суглобового хряща. Експеримент проведений на 16 кролях самцях лінії Шиншила. Спочатку випадковим чином тварин розподілено на чотири групи по чотири тварини: 1) контрольна (інтактна); 2) модель остеоартриту + двократне внутрішньосуглобове введення 0.9% розчину NaCl через 4 та 6 тижнів; 3) модель остеоартриту + двократне внутрішньосуглобове введення збагаченої тромбоцитами плазми через 4 та 6 тижнів; 4) модель остеоартриту + внутрішньосуглобове введення концентрату червоного кісткового мозку через 4 та збагаченої тромбоцитами плазми через 6 тижнів. Експериментальні умови на обох колінних суглобах у кожної тварини були ідентичні. Через 2 місяці від початку моделювання остеоартиту тварин виводили з експерименту. Епіфізи стегнової та великогомілкових кісток тварин виділяли 3 для гістологічного та морфометричного досліджень. Морфометрично оцінювали діаметр дефекту, товщину перифокального суглобового хряща, відносну щільність субхондральної кісткової тканини. Статистичний аналіз груп з остеоартрозом показав, що у групі 3 щільність хондроцитів була більшою від групи 2 на 43,6% (P<0,05), а у групі 4 – на 46,8% (P<0,05). Тобто дистрофічні зміни хондроцитів у перифокальній зоні суглобового хряща стегнової кістки були меншими після ін’єкції збагаченої тромбоцитами плазми і концентрату аспірата кісткового мозку. Аналіз структурних змін субхондральної кістки також засвідчив деструкційні зміни та резорбцію трабекулярної кістки у перифокальній зоні. Слід зазначити, що відносна щільність кісткової тканини у групах 3 і 4 була візуально більшою порівнючи з групою 2 (57,7% і 50,1% проти 36,2%, P>0,05). У групі з використанням концентрату аспірата кісткового мозку встановлено більшу товщину гіалінового хряща великогомілкової кістки на 23,1% (Р<0,05) порівняно до групи з 0,9 % NaCl та групи з подвійним використанням збагаченої тромбоцитами плазми. Отримані дані об’єктивізували вплив збагаченої тромбоцитами плазми та концентрату червоного кісткового мозку на суглоб в умовах експериментального моделювання остеоартриту. Другий експериментальний розділ присвячений розробці та вивченню двох способів отримання збагаченої тромбоцитами плазми. Важливим компонентом, що змінює клінічний ефект від використання збагаченої тромбоцитами плазми є наявність або відсутність лейкоцитів (нейтрофілів, моноцитів, макрофагів та лімфоцитів). У 27 здорових добровольців проводився забір трьох зразків крові, які в подальшому оброблялись двома різними способами, а отримані біологічні продукти вивчались. Перший зразок крові не оброблявся і був контрольним для визначення показників цільної крові. В обох дослідних зразках обробку крові проводили центрифугуванням 0.6 G протягом 8хв. Принципова 4 різниця полягала в тому, що другий зразок центрифугували в стерильній пластиковій пробірці і забір плазми був ручним, третій зразок центрифугувався в стерильній закритій шприц-пробірці і забір плазми проводився без взаємодії з повітрям, за допомогою системи конекторів з захопленнях лейкоцитарного шару. Отримані матеріали вивчали за допомогою автоматичного гематологічного аналізатора. Були отримані наступні середні показники: перший зразок (контрольний) - концентрація тромбоцитів 228,69 (+-39,15)*10⁹/л та лейкоцитів 5,18 (+-1,32)*10⁹/л; другий зразок (пробірка + ручний забір) - концентрація тромбоцитів 429,38 (+-79,92)*10⁹/л та лейкоцитів 0,85 (+- 0,34)*10⁹/л; третій зразок (поршень шприца + закритий вакуумний забір) - концентрація тромбоцитів 541,15 (+-85,49)*10⁹/л та лейкоцитів 6,56 (+- 1,92)*10⁹/л (P < 0.05). Розроблені некомерційні прості два способи обробки крові для отримання PRP чи L-PRP. Використання в клінічній практиці різних продуктів може змінюватись в залежності від поставлених задач. В клінічній частині дисертаційної роботи наведено основні принципи діагностики та лікування остеоартриту колінного суглоба. Розроблено фасталгоритм діагностики та лікування виділених 4 фенотипів остеоартриту колінного суглоба. Розроблена і детально описана методика пункції, обробки та використання червоного кісткового мозку. Розроблені технічні засоби: кістковомозкова голка та шприц-пробірка, які мають ряд переваг.

Дата реєстрації

2023-09-19

Додано/оновлено в НРАТ

2025-08-04 / 2026-07-01