Реєстраційний номер
0213U006405,
0108U011159
, Науково-дослідна робота
Назва роботи
Дослідження механізмів апоптозу імунокомпетентних клітин при патологічних станах на рівнині та у високогір'ї
Назва етапу роботи
Керівник роботи
Багдасарова І.В., Тарадій Неллі Миколаївна,
Дата реєстрації
17-05-2013
Організація виконавець
Міжнародний центр астрономічних та медико-екологічних досліджень НАН України
Опис етапу
Об'єкт дослідження: 114 хворих (75 дітей в віці від 5 до 12 років з імуно-запальними захворюваннями нирок, 39 дітей з хронічним та гострим інфекційно-запальним захворюванням - мононуклезом), умовно здорових мешканців високогір'я (21) и рівнини (19), умовно здорових дітей віком від 5 до 12 років (17). Матеріал дослідження: венозна кров, мікробіоптати нирки, препарати тимуса та селезінки щурів. Мета роботи: вивчити роль апоптозних і диференційних маркерів ІКК в хронізації запальних процесів в умовах рівнини та високогір'я Методи дослідження: клініко-лабораторні, імуноцитохімічні, імунофлуоресцентні, мікробіологічні, біохімічні, інструментальні, УЗД. Досліджували експресію, дислокацію, колокалізацію апоптозних маркерів: Fas/ CD95+, Bax, рецепторів к TNF і IFN , Bcl-2,IL-2R, iNOs, трансмембраних IgA, IgM, IgG, IgD в CD4,CD7, CD8,CD16,CD20, CD57, CD25 в ІКК и біоптатах ниркової тканини, селезінки і тимуса щурів. Маркери виявляли за допомогою моноклональних сироваток, мічених флюоресцентними мітками. Результати враховували за допомогою мультимедійної люмінесцентної (Carl Zeizz -250SF, комп'ютерна програма Multichenel AxioVision 4.4) та конфокальної лазерной сканируючої мікроскопії (Axioskop-2 LSM 5 PASCAL Carl ZEISS з гелій-неоновим і аргоновим лазерами) при одномоментному трьох- і чотирьохкольоровому фарбуванні. Отримані зображення сканували та обробляли за допомогою ком'ютерної програми LSV510. У мешканців високогір'я переважаючим проапоптозним фактором з аутокринним та паракринним механізмом дії є NO. При цьому пригнічується Fas-залежний апоптоз та відмічається зниження експресії Annexin V, що може сприяти хронізації запальних захворювань в високогір'ї за рахунок зниження протизапальних та антикоагуляційних властивостей імуної системи. Хронічний імуно-запальний процес характеризується активізацією рецептор-залежного апоптоза по TNF? шляху з активізацією одночасно рецепторів до INF?, гіперекспресією iNOs , та інертністю Fas - рецепторного апоптоза. У хворих на ХГН активізована експресія антиапоптозного білка Вcl2 більше в цитотоксичних Т-лімфоцитах. В результаті лікування значно підвищується експресія TNF? рецепторів і активізується Fas - рецепторный апоптоз. Встановлені якісні і кількісні зміни колокалізації і дислокації експресуємих маркерів апоптоза в ІКК та кореляційні тісні взаємозв'язки між маркерами після курсу етиопатогенетичної терапії. Порівняльне дослідження маркерів апоптоза при мононуклеозі показало високий ступень їх експресії, більш значно виражену у хворих ОЭБВИ. Всі досліджувані маркери апоптоза перевищували контрольні значення у 2-3 і більш разів. Як при гострому, так і хронічному процесах рівень експресії Bcl-2 був статистично рівнозначним. Активація апоптоза при инфекційно-запальноу процесі проходить по рецептор-залежному шляху через рецептори для Fas, INF? і TNF?. AnnV в ІКК хронічних хворих була вище, ніж при гострому процесі. Експериментальні дослідженні у щурів в умовах впливу гострої та хронічної гіпоксії показали, що структурні перебудови, мітохондріальні дисфункції тісно зв'язані з тривалістю та ступенем адаптації до гіпоксії і процеси апоптоза за цих умов протікають по мітохондріальному і оксид азот-активованому шляху. Індивідуальна карта маркерів апоптозу та диференціювання , які експресуються на ІКК на тлі проведеного імунокорегуючого лікування, є точкою відліку для корекції імунних порушень на етапах етіопатогенетичної терапії. КЛЮЧОВІ СЛОВА: імуно-компетентні клітини, експресія рецепторів, маркери апоптозу и диференціровки, хронічні иммуно-запальні та інфекційно-запальні процеси, гломерулонефрит, мононуклеоз-ЕБВІ, гіпоксія, КВЧ- терапія.
Опис продукції
Встановлені шляхи ініціювання апоптозу в залежності від запального процесу: при хронічному імунозапальному процесі активізація апоптозу протікає по рецептор-залежному TNF?R, Fas/Apo1 шляху, при хронічному інфекційно-запальному процесі активізація апоптоза відбувається по рецептор-залежному шляху INF? і TNF?; при гіпоксії у високогір'ї переважає мітохондріальний та NO-залежний шлях активізації апоптоза.
Автори роботи
Додано/оновлено в НРАТ
2020-04-02
