Реєстраційний номер
0215U006250,
0112U002334
, Науково-дослідна робота
Назва роботи
Поліморфізм стресових генів та молекулярно-біохімічні механізми клітинного захисту у рослин
Назва етапу роботи
Керівник роботи
Волков Роман Анатолійович, Доктор біологічних наук
Дата реєстрації
30-01-2015
Організація виконавець
Чернівецький національний університет імені Юрія Федьковича
Опис етапу
Визначено рівень окисного пошкодження білків та ліпідів, вміст стрес-асоційованих метаболітів (аскорбату, глутатіону), активність та ізоферментні спектри каталази (CAT), аскорбат та гваякол пероксидаз (APX та POD), глутатіон та дегідроаскорбат редуктаз (GR та DHAR), а також досліджено зміни експресії генів Apx, Cat та sHsp за дії підвищених температур та стресу, викликаного високими концентраціями іонів міді та кадмію в листках Arabidopsis thaliana дикого типу та мутантів із втраченою активністю ізоформ каталази CAT2 та CAT3. Створено та охарактеризовано трансгенну лінію арабідопсису з підвищеною активністю каталази. Показано, що у мутантів спостерігається активація ензиматичних та не ензиматичних ланок антиоксидантного захисту, спрямована на компенсацію дефіциту ізоформ каталази. Вперше встановлено, що у мутантів має місце пригнічення транскрипції генів теплового шоку за дії підвищених температур та прискорення розвитку вторинної стресової відповіді.
Опис продукції
Запропоновано метод визначення вмісту аскорбату та дегідроаскорбату в рослинних об’єктах, який ґрунтується на використанні ферменту аскорбатоксидази для окислення аскорбату у пробі та вимірюванні залежного від вмісту аскорбату зниження оптичної щільності проби за довжини хвилі 265 нм. Для визначення вмісту дегідроаскорбату у пробі проводиться його відновлення в присутності дітіотрейтолу, що супроводжується зростанням поглинання світла за довжини хвилі 265 нм. Цей метод має ряд переваг над традиційним титрометричним методом, який базується на застосуванні 2,6-діхлорфеноліндофенолу. Суттєвим недоліком традиційного методу є низька специфічність, оскільки цілий ряд сполук, які можуть бути присутні у пробі, здатні впливати на результати вимірювань. Відповідно, головною перевагою нового методу є використання аскорбатоксидази для визначення вмісту аскорбату, що забезпечує високу специфічність та чутливість і дозволяє суттєво знизити кількість рослинного матеріалу, який необхідний для проведення визначення. При
Автори роботи
Буздуга Інна Миколаївна
Волков Роман Анатолійович
Діденко Наталія Олександрівна
Касіянчук Руслана Михайлівна
Панчук Ірина Ігорівна
Руснак Тетяна Олександрівна
Тинкевич Юрій Олегович
Череватов Олександр Володимирович
Язловицька Людмила Степанівна
Додано/оновлено в НРАТ
2020-04-02
