Реєстраційний номер
0221U107195,
0121U110360
, Науково-дослідна робота
Назва роботи
Молекулярні механізми залучення вітамін D-ауто/паракринної сиcтеми в регулюванні
клітинних ефектів S-протеїну коронавірусу SARS-CoV-2.
Назва етапу роботи
Керівник роботи
Лісаковська Ольга Олександрівна, Кандидат біологічних наук
Дата реєстрації
29-12-2021
Організація виконавець
Інститут біохімії ім. О. В. Паладіна Національної академії наук України
Опис етапу
З використанням генетичних конструкцій pET28a-SARS-CoV-2-Spike-RBD та pET28b-mNG-RBD у прокаріотичній системі експресії напрацьовано рекомбінантний рецептор-зв’язувальний домен (RBD) S-протеїну коронавірусу SARS-CoV-2 та похідне RBD, флуоресцентно мічене mNeonGreen, а також проведено їх очистку методом афінної хроматографії. Продемонстровано, що метаболічна активність клітин епітелію нирки зеленої мавпи МА-104 знижувалась за дії гормонально активної форми вітаміну D3 – 1,25(OH)2D3 у діапазоні концентрацій 0,78-50 нмоль/л, в той час як метаболічна активність клітин епітелію тестикул поросяти ST інгібувалась лише при найнижчій концентрації 1,25(OH)2D3 – 0,78 нмоль/л. Показано, що 1,25(OH)2D3 у діапазоні концентрацій 25-100 нмоль/л підвищує відсоток зв’язування RBD-FITC та RBD-mNeonGreen з ACE2 клітин MA-104 та не впливає на утворення RBD-FITC-ACE2 комплексу на клітинах ST. Продемонстровано, що опосередковані молекулярні механізми протекторної дії вітаміну D3 при SARS-CoV-2 можуть включати в себе: зниження продукування активних форм кисню, експресії ензиму гліоксилази 1, що відповідає за утилізацію метилгліоксалю, інгібування сигнальних каскадів p38 та NF-κB (на рівні мРНК та протеїну), а також збільшення вмісту протеїну ІκB – інгібітору NF-κB.
Опис продукції
Автори роботи
Криніна Ольга Ігорівна
Мазанова Анна Олександрівна
Тихоненко Тетяна Михайлівна
Додано/оновлено в НРАТ
2022-03-09
